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芍药有关标准论文,关于小儿健胃糖浆的质量标准相关在职研究生毕业论文范文

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[摘 要 ] 目的 研究制订小儿健胃糖浆的质量标准. 方法 对山楂、麦冬药材进行薄层色谱鉴别;高效液相法采用双波长、梯度洗脱,同时测定白芍和牡丹皮中的芍药苷、陈皮药材中的橙皮苷含量. 结果 薄层色谱鉴别分离度好,专属性强,方法可行;含量测定在检测波长芍药苷(230 nm)、橙皮苷(283 nm)条件下,分别在7.68~491.76、7.66~491.72 μg呈良好的线性关系,回归方程为Y等于11.305X-21.52、R2等于0.9995(n等于7),Y等于16.843X+6.952、R2等于0.9999(n等于7),平均回收率为99.14%,RSD等于1.99%、99.85%,RSD等于2.57%. 结论 本方法操作简单、数据精确、专属性强,可为提高小儿健胃糖浆质量标准提供合理依据.

[关 键 词 ] 小儿健胃糖浆;山楂;麦冬;陈皮、白芍;薄层色谱法;双波长高效液相法.

[中图分类号] R927.11 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2014)03(a)-0008-04

小儿健胃糖浆是由山楂、麦冬、陈皮、白芍、牡丹皮等11味药材组成的中药制剂,具有健脾消食,清热养阴之功效,主要用于脾胃阴虚所致的食欲减退、消化不良.该处方于1995年收载于原卫生部《药品标准》中药成方制剂第10册[1],是本公司主要品种之一.由于历史原因,该质量标准仅有糖浆剂的常规检查项目,不符合目前药品质量标准的要求.本实验是在原质量标准的基础上进行提高与完善、研究与探索,同时增加薄层色谱鉴别和高效液相含量测定检验项目,以力求科学、客观地评价新质量标准的可行性和适用性.

1.仪器、试剂与药品

高效液相色谱仪:Agilent 1100型号,DAD检测器;电子天秤:Sartorius-CPA225D,十万分之一;CMAG REPROSTARⅡ型号成像系统;硅胶G板(Merck薄层板,德国进口);乙腈(色谱纯),水(超纯水);C18固相萃取小柱(Water Sep-pak);其余试剂均为分析纯;麦冬和山楂对照药材(中国药品生物制品检定所,批号:121013-201009、1138-20000,供鉴别用),芍药苷和橙皮苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号:110736-201035、110721-201014,供含量测定用);小儿健胃糖浆和缺麦冬、山楂、陈皮、白芍和牡丹皮阴性样品(由广州王老吉药业股份有限公司提供).

2.实验方法与结果

2.1 麦冬薄层色谱鉴别

取本品50 ml,加水40 ml、盐酸0.5 ml,乙醚30 ml,加热回流30 min,放冷,分取乙醚液,酸水层再用乙醚萃取2次,每次20 ml,合并乙醚液,挥干,残渣加乙酸乙酯1 ml溶解.作为供试品溶液[2-4].取麦冬对照药材2 g,加甲醇15 ml,超声处理30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加水20 ml溶解,自“盐酸0.5 ml等”起,同法制成对照药材溶液.按照薄层色谱法(《中国药典》一部附录Ⅵ B)试验,吸取上述两种溶液各6 μl,分别条状点样于同一硅胶G板上,以二氯甲烷-甲醇(40∶1)为展开剂,展开,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,105℃加热至斑点显色清晰,放冷.供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点.阴性无干扰.结果具体见图1.

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2.2 山楂薄层色谱鉴别

取“2.1”项下的样品作为供试品溶液.另取山楂对照药材2 g,加1%盐酸乙醇液30 ml,超声处理30 min,滤过,蒸干,残渣加无水乙醇1 ml溶解,作为对照药材溶液.按照薄层色谱法(《中国药典》一部附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各8 μl,分别条带状点样于同一硅胶G薄层板上,以乙醚-二氯甲烷-甲酸(5∶5∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,于105℃加热15 min,喷以溴酚蓝试液.供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点[5].阴性无干扰.结果具体见图2.

2.3 白芍、牡丹皮、陈皮含量的测定

2.3.1 色谱条件及系统适应性试验

色谱柱:Phenomenex Luna柱(250 mm×4.6 mm×5 μm);以乙腈为流动相A,0.1%磷酸溶液为流动相B;流动相设置具体见表1.按表1中的规定进行梯度洗脱;流速为1 ml/min,检测波长:230 nm(芍药苷)、283 nm(橙皮苷);柱温为35℃.理论板数以芍药苷计算应≥3000,芍药苷与相邻峰之间的分离度均>1.5.

2.3.2 检测波长的确定

高效液相色谱仪:Agilent 1100,DAD检测器,对芍药苷、橙皮苷对照溶液进行光谱扫描,波长范围为200~400 nm,结果芍药苷在230 nm处有最大吸收,橙皮苷在283 nm处有最大吸收.结果具体见图3、图4.

2.3.3 专属性试验

2.3.3.1 对照品溶液的配制 取芍药苷和橙皮苷对照品各适量,精密称定,加甲醇制成每毫升各含30 μg的混合溶液,摇匀,即得(图5).

2.3.3.2 供试品溶液的配制 精密量取本品10 ml,通过已处理好的C18小柱(规格:500 mg,先用甲醇10 ml冲洗,再用水10 ml冲洗,备用),依次用水、5%甲醇、60%甲醇各15 ml进行洗脱,收集60%甲醇洗脱液,蒸干,残渣用60%甲醇溶解并转移至5 ml量瓶中,用60%甲醇稀释至刻度,摇匀,即得(图6).

2.3.3.3 阴性对照溶液&

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#30340;制备 ①取缺白芍和牡丹皮药材的处方制剂,按一定的比例制成阴性样品、再按供试品溶液的配制方法制成缺白芍和牡丹皮阴性对照溶液;②取缺陈皮药材的处方制剂,按一定的比例制成阴性样品、再按供试品溶液的配制方法制成缺陈皮阴性对照溶液.

2.3.3.4 将以上3种溶液分别注入高效液相色谱仪中,得色谱图(图7、图8).结果:白芍和牡丹皮、陈皮均阴性无干扰,该方法专属性强. 2.3.4 线性关系的考察

2.3.4.1 芍药苷 取芍药苷对照品适量,分别配制成每毫升各含7.68、15.37、30.74、61.47、122.94、245.88、481.76 μg溶液,进样量为10 μl.以对照品量(μg)为横坐标(X),峰面积为纵坐标(Y),绘制标准曲线;芍药苷的线性方程:Y等于11.305X-21.52,R2等于0.9995.结果芍药苷在7.68~491.76 μg范围内呈良好的线性关系.

2.3.4.2 橙皮苷 取橙皮苷对照品适量,分别配制成每毫升各含7.66、15.33、30.67、61.34、122.68、245.36、481.72 μg溶液,进样量为10 μl.以对照品量(μg)为横坐标(X),峰面积为纵坐标(Y),绘制标准曲线;橙皮苷的线性方程:Y等于16.843X+6.952,R2等于0.9999.结果橙皮苷在7.66~491.72 μg范围内呈良好的线性关系.

2.3.5 重复性试验

取同一批号样品6份,精密量取,按供试品溶液制备方法,测定,计算.芍药苷含量的RSD等于1.26%;橙皮苷含量的RSD等于0.69%.

2.3.6 稳定性试验

取同一供试品溶液,在0、2、4、8、16、24、48 h分别进样,测定,计算,结果芍药苷含量的RSD等于1.78%;橙皮苷含量的RSD等于0.44%,说明供试品溶液至少在48 h内稳定.

2.3.7 精密度考察

取对照品溶液10 μl,连续进样5次,测定芍药苷和橙皮苷峰面积值,分别计算得RSD等于0.72%、0.33%.结果所建立方法具有良好的精密度.

2.3.8 加样回收率考察

精密量取样品5 ml(已知含量),分别精密加入一定量的芍药苷和橙皮苷对照品,测定,计算回收率,结果见表2、表3.

3.讨论

小儿健胃糖浆对于婴幼儿的脾胃阴虚所致的食欲减退、消化不良有良好的治疗作用,本研究在原质量标准的基础上,增加了麦冬和山楂的薄层鉴别,白芍和牡丹皮、陈皮的含量测定.

处方中的白芍具有养血柔肝、缓中止痛、敛阴收汗的功能;陈皮具有理气和中,燥湿化痰,利水通便的功能[6],均为处方中的主要成分,曾有许多文献分别报道了检测白芍和陈皮含量的方法[7-9].但本实验采用双波长,梯度洗脱方法测定白芍和陈皮的含量,达到减少实验时间的目的.

橙皮苷同时在波长230 nm和283 nm处有吸收峰,但230 nm波长,有干扰而分离度差,283 nm无干扰、分离度好,并与《中国药典》中“陈皮”药材的质量标准所规定的吸收波长一致[10],故该方法中陈皮的吸收波长确定为283 nm.

由于该制剂为糖浆剂,曾采用正丁醇萃取、D101大孔树脂柱分离法、固相萃取法等三种方法,分别同时提取白芍和牡丹皮中的芍药苷和陈皮中的橙皮苷,再采用双波长检测、梯度洗脱,进行含量测定,结果三种提取方法数据基本一致,重现性好,数据精确,但是固相萃取法操作简单,方便快捷.


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[参考文献]

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[9] 刘志才.平胃胶囊中橙皮苷的含量测定[J].黑龙江医药,2003,16(5):437-438.


本篇论文来自:http://www.tjhyzyxy.com/biaozhun/454643.html

[10] 项菲,肖燕.高效液相色谱法测定小儿止咳糖浆橙皮苷的含量[J].中国民族民间医药杂志,2008,17(7):31-32.

(收稿日期:2014-01-02 本文编辑:林利利)

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