俄色总黄酮对糖尿病的药理作用

点赞:8329 浏览:32602 近期更新时间:2024-02-22 作者:网友分享原创网站原创

[摘 要 ] 目的 探讨俄色总黄酮( Total Flonoids from E’se, ES)对糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)小鼠的治疗作用.方法 建立链脲佐菌素( Streptozotocin,STZ)致DM小鼠模型,灌胃ES 180、90、45 mg/kg连续7 d.结果 试验后测得DM小鼠体重减轻,血糖升高,肝及脾肿大、胸腺萎缩的症状得以缓解,肝糖原含量有一定程度的降低、血清胰岛素含量有一定程度的升高.结论 ES能改善DM小鼠一般状态,明显降低肝脏和脾脏系数,有调节血糖、肝糖原合成和血清胰岛素分泌作用趋势,具有治疗DM的作用.

[关 键 词 ] 糖尿病;俄色总黄酮;链脲佐菌素

[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2013)05(b)-0025-03

藏药“俄色”是我国四川省甘孜藏族自治州民间习用藏药,最早记载于《藏药晶镜本草》和《藏汉大辞典》,经本草考证为来自变叶海棠M.toringoides (Rehd.) Hughes.或花叶海棠M.transitoria (Batal.) Schneid.的叶[1],在当地常与酥油同煮作茶饮,对防治高血糖、高血脂和高血压效果较好.ES是从俄色中提取的有效成分群,其药理作用尚不明确.该课题采用实验性DM模型,拟初步探讨ES对DM的治疗作用,从而为俄色的开发提供科学依据.

1.材料与方法

1.1 药物与试剂

ES,由西南民族大学少数民族药物研究所提供,批号20100709,人日用量为450 mg,相当于原药材15 g/kg,用蒸馏水配制成4.5、9.0、18.0 mg/ml药液备用;STZ(批号S0130),临用前用柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(pH等于4.3)配制成15 mg/mL;盐酸二甲双胍片(批号110S124);柠檬酸、柠檬酸钠(批号分别为:20101026、20101017),按1:1.32的比例配成缓冲溶液(pH等于4.3);肝/肌糖元试剂盒(批号20111223);小鼠胰岛素ELISA试剂盒,(批号201204).

1.2 动物

昆明种小鼠,清洁级,体重雄性23~26 g,雌性18~22 g,由成都中医药大学动物研究中心提供,动物质量合格证号:SCXK(川)2008-11.

1.3 主要仪器

罗氏血糖检测仪及血糖试纸;TD12001B型电子天平;Varioskan型多功能酶标仪.

1.4 实验方法

1.4.1 DM小鼠模型制备 取健康、合格的SPF级昆明种小鼠100只,雌雄各半,待适应环境后,分为空白组(N等于10)和造模组(N等于90).将小鼠禁食不禁水12 h后,参考文献报道并根据预试,造模组按150 mg/kg腹腔注射STZ溶液,空白组注射生理盐水,给药体积10 mL/kg,然后常规饲料喂养.3 d后,禁食6 h,尾尖采血测血糖,以空腹血糖>11.1 mmol/L者为DM小鼠模型,其余动物淘汰.

1.4.2 分组与给药 将造模成功的小鼠按血糖和体重随机分成模型组、二甲双胍组和ES高、中、低剂量组.自模型制备成功当天开始灌胃相应药液10 mL/kg,其中空白组和模型组灌胃蒸馏水,ES高、中、低剂量组给药剂量依次为180、90、45 mg/kg,1次/d,连续7 d.

1.4.3 指标测定 实验期间观察动物的一般状态,隔日称体重.给药第3 d和第7 d测定给药后1 h空腹血糖;第7 天各组小鼠测血糖后眼眶取血,酶联免疫法测定血清胰岛素水平,剖取肝、脾和胸腺,称湿重,计算脏器系数(脏器湿重/体重×100%),留取部分肝脏组织,匀浆后测定肝糖原.

1.4.4 统计方法 实验数据采用SPSS 17.0统计软件包进行分析.所有数据均以均数±标准差(x±s)表示,数据分方差齐性与方差不齐,采用单因素方差分析.

2.结果

2.1 对一般状态的影响

造模的90只小鼠49只血糖超过11.1 mmol/L,造模成功率约60%.注射STZ后,模型小鼠在24~48 h内即出现多饮、多食、多尿和体重减轻,小鼠精神萎靡不振,活动减少,被毛逐渐稀疏无光泽,甚至泛黄,排泄物有异味.ES高、中、低剂量灌胃模型小鼠可改善上述症状,体重有升高趋势,但与模型组比较无统计学意义.二甲双胍能改善模型小鼠整体状态,体重无明显上升.体重变化如图1所示.

2.2 对空腹血糖的影响

与空白组相比,模型组血糖在给药期间显著升高(P<0.01).与模型组比较,ES高、中、低剂量在给药后第3、第7 天均有降低血糖的趋势,以高剂量作用最明显,但差异无统计学意义.二甲双胍组在第3天血糖明显低于模型组(P<0.01),第7天亦降低,但差异无统计学意义.结果见表1.

①与空白组比较,Levene方差齐性检验,治疗前、第3天、第7天的F值分别是4.326、2.876、9.560,P值分别为0.002、0.023、0.000,均为方差不齐,采用Tamhane检验,模型组与空白组比较,治疗前、第3天、第7天的P值分别为0.001、0.000、0.000;

②与模型组比较,Levene方差齐性检验,第3天的F值分别是2.876,P值分别为0.023,为方差不齐,采用Tamhane检验,二甲双胍组在第3天P值为0.002.

2.3 对肝、脾、胸腺脏器系数的影响

DM小鼠肝、脾脏器系数较空白组均升高,其中肝脏系数有显著性差异(P<0.01).与模型组比较,ES高剂量显著降低肝脏系数,中剂量显著降低脾脏系数(P<0.05).二甲双胍有降低脾脏系数的趋势.见表2.


①与空白组比较,Levene方差齐性检验,肝脏系数、脾脏系数、胸腺系数的F值分别是1.157、1.048、0.257,P值分别为0.342、0.400、0.935,均为方差齐,采用LSD检验,模型组与空白组比较,肝脏系数、脾脏系数、胸腺系数的P值分别为0.000、0.168、0.065; ②与模型组比较,Levene方差齐性检验,肝脏系数、脾脏系数的F值分别是1.157、1.048,P值分别为0.342、0.400,均为方差齐,采用LSD检验,ES高剂量肝脏系数P值为0.016;ES中剂量脾脏系数P值为0.043.

2.4 对肝糖原和血清胰岛素的影响

DM小鼠血清胰岛素水平有降低趋势,肝组织糖原有升高趋势,但与空白组比较均差异无统计学意义.与模型组比较,ES各剂量肝糖原含量有降低,高、低剂量血清胰岛素有升高,但均无统计学意义.二甲双胍有降低肝组织糖原作用趋势.结果见图2.

3.讨论

DM是由遗传因素和环境因素导致的慢性全身性代谢性疾病,全球发病率高,预计至2025年,世界上的DM患者数目将达到3.8亿[2],并发症多,严重影响患者生活质量,并威胁生命,因此DM的防治成为世界难题.许多中药和其他民族药被报道具有降血糖作用,机制为保护、修复和促进胰岛β细胞分泌、拮抗升糖激素、提高胰岛素敏感性、增强对糖的吸收利用和糖原合成、抑制α-葡萄糖苷酶活性等[3].大剂量STZ诱导的1型DM模型是经典的模型之一,其机理是破坏胰岛β细胞从而导致体内胰岛素的绝对不足.该课题在参考文献剂量的基础上并结合预试,以150 mg/kg一次性腹腔注射制备模型,出现典型的“三多一少”症状和持续的高血糖,模型建立成功,成模率达60%以上.ES 45、90、180 mg/kg灌胃可明显改善上述症状,具有降低血糖的趋势.

STZ所致DM小鼠肝脏系数变大,肝功能损伤,从而影响肝脏调节血糖功能[4].有文献报道该模型小鼠有脾脏和胸腺系数的降低,从而导致免疫功能下降[5].该研究中模型小鼠脾脏系数无明显变化,胸腺系数有所下降,ES高剂量能明显降低肝脏系数,同时有升高胸腺系数的作用趋势,提示本药可通过改善肝功能和免疫功能调节血糖.

机体的血糖浓度主要是通过肝脏调节、血糖自身调节和神经-激素调节3大途径来调节的.其中,肝脏主要是通过糖原的合成与分解及糖异生作用调节血糖,当血糖浓度高于正常时,肝糖原合成作用加强而糖异生减弱,使血糖降低.胰岛素是机体内唯一的降血糖激素,主要由胰岛β细胞分泌,DM是因为机体胰岛素的绝对或相对不足或机体对胰岛素敏感性下降所致.该实验中,因模型组小鼠一直处于高血糖状态,刺激肝脏肝糖原合成增多,经ES或二甲双胍治疗后,血糖水平有所下降,因此肝糖原合成亦相对减少,如结果所示.模型小鼠血清胰岛素水平有下降的趋势,经ES治疗后有所升高,提示,ES可能有促胰岛素分泌作用.

综上,ES可通过改善全身状态、调节糖原合成和促进胰岛素分泌、增强免疫等多途径综合作用治疗DM,具有开发前景.

[参考文献]

[1] 王道清,李 敏,石万银.藏药“俄色”的资源调查及生药学研究[J].中药与临床,2011,2(3):14-16.

[2] 邵义文,严群超,朱 媛.中药对糖尿病并发症的治疗现状[J]. 广东药学院学报,2009,25(1):108-110.

[3] 卢兆莲,黄才国.中药降糖作用机理的研究进展[J].中医药导报,2009,15(11):76-78.

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[4] 邢莎莎,陈 超.香椿子总多酚对糖尿病小鼠的糖血糖作用[J].中国实验方剂学杂志,2011,17(11):169-171.

[5] 黄桂红,黄纯真,黄仁彬.阳桃根多糖对糖尿病小鼠胰岛素及胸、脾指数的影响[J].中国药师,2009,12(7):848-850.

(收稿日期:2012-12-28)