网站原创【中图分类号】 R446 6 【文献标识码】 B 【文章编号】1185-1672(2006)-08-0717-02
肌钙蛋白（Tn）是组成横纹肌细丝的结构蛋白,其亚单位I、T、和C组成复合物,在肌肉收缩和舒张过程中起重要调节作用,其中肌钙蛋白I（cTnI）经大量研究被认为是诊断心肌细胞损伤的特异性强和敏感性高的血清指标之一[１],特别是诊断急性心肌梗死（AMI）[２]的“金指标”.在监测再灌注和估计梗死面,预测不稳定型心绞痛（UAP）[３],围手术期心肌损伤监测等方面广泛应用于临床.由于cTnI检测方法研究进展较快,各种方法的检测原理及所需条件也各不相同,现将几种常用方法的原理、特点及所需设备情况介绍如下,供同人们参考,可根据医院的实际情况选用不同的检测方法.
1.金标免疫法
该方法采用免疫色谱干膜层析活性卡一步法[４]检测,其最低检出限为0 3ug/L.具有标本用量少,简便快速,不受时间、地点限制,不需任何设备,10min内出结果,24h全方位为患者怎么写作,但结果只能定性,并受主观因素影响.试剂存储方面,单人单份.最适合于AMI的床旁检测.
2.放射免疫法
该方法于1987年由Cummins最早建立[５],是采用双抗体竞争法,通过检测放射元素标记的cTnI的放射强度,再通过标准曲线求得cTnI的浓度.该方法最低检出限为10ug/L.该方法反应时间长、且操作复杂,需要放免仪,试剂半衰期短.临床应用受到一定限制.
3.ELISA法
该方法始于80年代中期,经过20几年的发展,检测原理经过多克隆抗体的竞争抑制法发展为单克隆的双抗体夹心法,测定灵敏度大大提高,其检出低线为0 1～0 2ug/L[６],30min完成实验.操作简便,所需设备均为免疫项目检测常规设备.目前已成为检测cTnI较为成熟的方法.
4.化学发光法
该方法应用双抗体一步夹心酶免疫分析,以化学发光剂为底物,用单克隆抗cTnI IgG抗体包被磁性微粒为固相载体,增加了吸附表面积,可在磁场中与液体分离,简化了操作步骤.在反应体系中,发光剂AMPPD在ALP催化下去磷酸化,生成具有荧光活性的AMPD,检测其相对光单位数,通过多点定标曲线计算cTnI浓度.AMPPD-ALP系统反应快速,其最低检出浓度为0.03ug/L[７],CV〈5%,AMPD荧光活性稳定性可达数天.利用该方法的分析系统多为Abbott公司的AxSYM分析系统,Beckman Coulter公司的Access分析系统.该方法是当今精密度与灵敏度具佳的方法,但需要专用设备,且仪器与试剂较为昂贵,适用于规模较大的医院.
cTnI检测方法较多,但目前尚未建立统一标准,方法之间、不同厂家之间结果差别较大,最多可差30倍[８],造成实验室与实验室间、医院与医院之间的结果难以参考,对临床工作开展带来很大的不便.目前寻求一种标准化方法已势在必行,建立标准的方法,开发和评估标准品,确定参考范围和判断值.