网站原创摘 要 ：目的 对常用藏药冬那端赤进行分子鉴定.方法 在民族植物学考察、经典分类学鉴定基础上,对植物核糖体DNA内转录间隔区（rDNA ITS）序列进行测定与分析.结果 确定西藏产冬那端赤的2种基源植物为玄参科婆婆纳属（Veronica L.）狭果组（Sect.Stenocarpon）的毛果婆婆纳Veronica eriogyne H.Winkl.、长果婆婆纳V.ciliata Fisch.,其nrDNA ITS序列分别为551、552 bp.序列分析显示,以ITS序列为分子标记,可区别两者及其近缘种.结论 nrDNA ITS序列在藏药冬那端赤及其近缘种中具有很好的种间分辨率,可用于冬那端赤的分子生药学鉴定.
关 键 词 ：藏药；冬那端赤；毛果婆婆纳；长果婆婆纳；分子生药学
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.03.019
中图分类号：R282.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2014）03-0065-04
藏药冬那端赤具有清热解毒、消炎、止血、止痛、排脓、杀菌等功效,可治疗肝炎、高血压及血热、肝胆火旺等证,外用生肌愈创[1].近年来,笔者开展了藏药的品种整理工作[2-4].在实地考察中注意到,西藏所产的冬那端赤至少涉及玄参科婆婆纳属（Veronica L.）狭果组（Sect.Stenocarpon）的毛果婆婆纳Veronica eriogyne H.Winkl.和长果婆婆纳V.ciliata Fisch..婆婆纳属国产61种,多数种类产于西南山地[5].由于
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基金项目：国家自然科学基金面上项目（81173654）；上海市教育委员会预算内科研项目（2011JW11）
通讯作者：赵志礼,E-mail：zhilzhao@sohu.
该属植物种类较多、共性特征明显,种内个体营养器官变化幅度较大,各地冬那端赤来源多样及传统鉴定方法的局限性等原因,有必要深入开展该品种的整理与鉴定工作.随着分子生物学技术的快速发展,植物DNA序列被大量应用于中药品种的分子鉴定,其中植物核糖体DNA内转录间隔区（rDNA ITS）序列的进化速率较快,可以提供较为丰富的变异位点,广泛应用于近缘属间、近缘种间的分子系统学研究及中药品种鉴别[6-9].本研究在民族植物学考察、经典分类学鉴定基础上,采集婆婆纳属狭果组Sect.Stenocarpon毛果婆婆纳、长果婆婆纳,同属蚊母草组Sect.Alsinebe蚊母草、直立婆婆纳及婆婆纳组Sect.Omphalospora婆婆纳、阿拉伯婆婆纳,玄参科玄参属玄参（外类群）的标本及实验样品,分别测定其rDNA ITS序列,构建系统发育树,并评价该片段在冬那端赤分子生药学鉴定中的种间分辨率,以期为藏药冬那端赤DNA条形码的建立与品种鉴定提供基础资料.
1.材料与方法
1.1 标本采集
材料分别于2012年4-8月采自上海、西藏,每个居群采集3份标本,同时取新鲜叶片,经硅胶快速干燥,备用.凭证标本经赵志礼教授鉴定,存放于上海中医药大学中药学院标本室.其中3份毛果婆婆纳V. eriogyne （CG12070301,CG12070302,CG12070304）样品来源于西藏自治区藏医药研究院的拉萨蔡公堂藏药栽培基地,其种质来源于拉萨市墨竹贡卡县日多乡怎村.同科的玄参Scrophularia ningpoensis用作外类群.见表1.