网站原创摘 要 ：为了进一步从蛋白水平上检测Ndfip1(Nedd4 family interacting protein 1)和Nedd4(Neuronal precursorcell-expressed developmentally down-regulated 4)在肢带型肌营养不良(Limb-girdle muscular dystrophy,LGMD)患者的肌肉组织中的表达及功能,以正常人的脑和肾脏组织的总RNA为模板,RT-PCR扩增Ndfip1和Nedd4部分编码序列,构建原核表达重组质粒pET28b-hNdfip1和pET28b-hNedd4,转化大肠杆菌BL21后,加IPTG诱导蛋白表达,Ni-NTA层析柱纯化蛋白,免疫BALB/c小鼠制备抗体,Western blot检测显示抗体能识别人和小鼠的Ndfip1和Nedd4,小鼠各组织中Ndfip1的蛋白表达谱与文献报道的Ndfip1 mRNA表达谱不一致,暗示Ndfip1具有转录和翻译水平的调控.
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关 键 词 ：Ndfip1；Nedd4；肢带型肌营养不良；抗体
中图分类号：Q78；R392
文献标识码：A
文章编号：1007-07847(2008)01-0040-05
Expression,Purification of hNdfip1 and hNedd4,and the Specific Antibody Preparation
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