网站原创摘 要 ：嗜酸氧化亚铁硫杆菌(Acidithiobacillus ferrooxidans)中APS还原酶是硫同化途径的一个关键酶,其对硫酸盐的还原及硫化物的氧化具有重要调节作用.本文以A.ferrooxidis ATCC23270基因组为模板,通过PCR扩增得到编码APS还原酶的cysH基因,与原核表达载体pLM1构建重组体,转化入大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)DH5α中,测序正确后,加IPTG诱导表达,用一步亲和层析法纯化出浓度和纯度都较高的APS还原酶.由蛋白颜色和紫外分析,确定其含有一个[Fe4s4]簇作为活性中心.表达产物进行SDS-PAGE分析,证实分子量为28kD.酶活测定表明其具有将APS还原为亚硫酸盐跟AMP的功能.
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关 键 词 ：嗜酸氧化亚铁硫杆菌；APS还原酶；cysH；克隆；表达；纯化
中图分类号：Q939.99 文献标识码：A 文章编号：1673-6273(2009)05-812-03