鼻腔分泌物中胃蛋白酶检测在咽喉反流诊断中的应用

[摘 要]目的探讨鼻腔分泌物中胃蛋白酶检测在咽喉反流（LPR）诊断中的应用.方法对50例慢性鼻-鼻窦炎（CRS）患者及20例健康志愿者行反流症状指数量表（RSI）、反流检查计分量表（RFS）检查,CRS患者行质子泵抑制剂（PPI）诊断性实验,三项评定中满足两项及以上者划入LPR组.用酶联免疫吸附方法（ELISA）检测鼻腔分泌物中的胃蛋白酶.比较上述两种方法对诊断LPR的差异.结果50例CRS患者采用RSI评分其诊断阳性率为66%（33/50）,RFS评分阳性率为70%（35/50）,PPI诊断性治疗阳性率为64%（32/50）,有72%（36/50）划入LPR组.CRS组、LPR组及健康组胃蛋白酶阳性率分别为88%（44/50）、100%（35/35）、30%（6/20）,差异有统计学意义（P<0.01）.对LPR的诊断,胃蛋白酶检测比三联诊断法灵敏度高（P<0.01）.结论鼻腔分泌物中胃蛋白酶检测可作为LPR诊断的可靠指标.

[关 键 词]鼻-鼻窦炎；咽喉反流；反流症状指数量表；反流检查计分量表；胃蛋白酶

[中图分类号]R766.04[文献标识码]A[文章编号]1674-4721（2013）12（a）-0045-03

慢性鼻-鼻窦炎（chronicrhinosinusitis,CRS）是耳鼻喉科临床上的常见病症,其病因与窦口鼻道复合体阻塞、感染、黏膜纤毛功能障碍、免疫功能紊乱等因素有关.近来有研究表明咽喉反流（larynghopharyngealreflux,LPR）可能导致耳鼻咽喉和肺的疾病,且已被证实CRS与其有关,抗反流治疗有助于CRS的康复[1].目前,LPR与CRS的相关性研究国内开展的较少.本研究应用反流症状指数量表（refluxsymptomindex,RSI）和反流检查计分表（refluxfindingscore,RFS）两种临床指标,结合质子泵抑制剂（protonpumpinhibitor,PPI）奥美拉唑诊断性治疗,联合诊断LPR,同时检测鼻腔分泌物中的胃蛋白酶,探讨其对LPR的诊断价值.

1资料与方法

1.1一般资料

选取2011年5月～2012年12月赣南医学院第一附属医院门诊治疗的50例CRS患者,其中,男32例,女18例,年龄25～49岁；平均（37.5±11.6）岁.病例选择标准[2]：①症状包括鼻塞,黏性、脓性鼻涕,伴随头面部胀痛,嗅觉减退或丧失.②鼻腔检查发现来源于中鼻道、嗅裂的黏脓性分泌物,中鼻道黏膜充血、水肿或有鼻息肉；CT扫描显示窦口鼻道复合体或鼻窦黏膜病变.同时选取20例无任何咽喉不适的健康志愿者,男12例,女8例；年龄19～30岁,平均（24.6±2.2）岁.本实验设计获得赣南医学院委员会通过,所有患者与健康志愿者均自愿加入.

1.2研究方法

1.2.1实验分组与诊断标准50例CRS患者,自填RSI量表[2-4],采用声嘶或发音障碍,持续清嗓,痰过多或鼻涕倒流,吞咽食物、水或药品困难,饭后或躺下后咳嗽,呼吸困难,频繁咳嗽,咽异物感及烧灼感、胸痛、胃痛等9项指标,按照从0～5的6个程度进行评分：0为无症状,5为最严重,评分≥13分定为阳性.另选两位医师（不同于首诊医师）参与喉镜下体征评分,参照RFS量表[2-4],对检测声带沟,喉室消失,红斑和（或）充血,声带水肿,弥漫性喉水肿,后联合增生,肉芽肿,喉黏膜增厚等8项体征进行评分,两位医生评分均≥7分定为阳性.50例患者均进行奥美拉唑的诊断性治疗（20mg,2次/d,连续用药14d）,以患者自述原有症状减轻或消退为有效.健康志愿者为健康对照组,共20例,仅行RSI和RFS量表评估,未予诊断性治疗.RSI≥13分、RFI≥7分、诊断性治疗三项评定中,满足两项及以上者划入LPR组[5].

1.2.2鼻腔分泌物中胃蛋白酶检测收集50例CRS患者及20例健康志愿者,擤鼻或回吸后经口吐出的鼻腔分泌物,共70份标鼻腔分泌物标本,每份≥0.5ml.标本处理方法：收集标本于液氮中,用时采用4℃下5000r/min（离心半径为7.2cm,下同）,离心15min,取上清液.分泌物标本以0.1%二硫苏糖醇（dithiothreitol,DDT）4倍体积充分混匀,37℃水浴10min,4℃下5000r/min离心15min,取上清液.行酶联免疫吸附试验（enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA）测定胃蛋白酶的含量,人胃蛋白酶ELISA试剂盒（No.CSB-E08919h）购于武汉华美生物.参照李湘平等[6]LPR诊断标准,胃蛋白酶质量浓度>0.1081ng/ml为阳性,划入LPR组；≤0.1081ng/ml者划入对照组.

1.3统计学分析

采用SPSS13.0统计分析软件包进行数据处理,计数资料采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义.

2结果

2.1LPR判断评分

50例CRS患者采用RSI评分其诊断阳性率为66%（33/50）,RFS评分阳性率为70%（35/50）,PPI诊断性治疗阳性率为64%（32/50）（表1）.以RSI、RFS及诊断性治疗三者联合诊断（以下简称三联诊断）结果为诊断标准划入LPR组的患者占72%（36/50）.

表1LPR判断评分（n）

2.2鼻腔分泌物中胃蛋白酶检测

胃蛋白酶阳性率在CRS组为88%（44/50）,LPR组为100%（35/35）,健康对照组为30%（6/20）,3组间比较差异有统计学意义（P<0.01）（表2）.

表2鼻腔分泌物中胃蛋白酶检测（n）

2.3鼻腔分泌物中胃蛋白酶检测与三联诊断的比较CRS患者同时行以胃蛋白酶检测与三联诊断,两种方法差异有统计学意义（χ2等于0.473<0.750,P<0.01）,说明两种检查方法一致性一般,对LPR的诊断,胃蛋白酶检测比三联诊断法灵敏度高（表3）.

表3胃蛋白酶检测与三联诊断的比较（n）

3讨论

CRS是指鼻与鼻窦黏膜的慢性炎症,鼻部症状持续超过12周,症状未完全缓解甚至加重,其临床主要症状表现为鼻塞,黏性、脓性鼻涕,其他症状表现为头面部胀痛,嗅觉减退或丧失.在进行临床诊断时应以上述两种或两种以上相关症状为依据,而且必须具备1项主要症状：鼻塞或黏性脓性鼻涕[5,7].目前研究表明CRS病因与窦口鼻道复合体阻塞、细菌感染、病毒感染、黏膜纤毛功能障碍、免疫功能紊乱等因素有关.目前仍有部分患者虽然行药物和手术治疗有效,但症状仍反复发作.

LPR又称食管外反流,指胃内容物反流到食管上括约肌以上的咽喉部,由此引起的症状和体征即为LPR相关性疾病[8],常见症状有频繁清嗓动作、慢性咳嗽、咽异物感、慢性声嘶、吞咽不适等.目前LPR已被证实与CRS有关,抗反流治疗有助于CRS的康复.

由于CRS与LPR关系非常密切,因此对CRS合并LPR的患者,早期诊断非常重要.目前,LPR与CRS的相关研究国内开展的较少.本研究应用RSI和RFS两种临床指标,结合PPI诊断性治疗,联合诊断CRS患者及健康实验者中LPR的发生率,发现有72%的患者被诊断为LPR,表明在对CRS患者尤其难治性CRS患者进行LPR筛查是有临床意义的,有助于对CRS病因的诊断以及后续治疗方案的选择.

RSI和RFS是临床广泛应用的对LPR进行评估的方法,但RSI对LPR的诊断阳性率低,本研究中为66%,与既往研究类似[9].而RFS评分受检查者主观因素影响较大.PPI诊断性治疗其疗程长,且目前对PPI使用剂量、频次、诊断价值仍有较大的争议,易导致LPR的过度诊断或漏诊,造成严重的临床后果[9-10].

胃蛋白酶作为一种生物学标志物,也被应用于LPR的诊断[11].国内研究表明[6],以痰液胃蛋白酶作为咽喉反流的诊断标准,其灵敏度高于RSI和RFS法.本研究采用一种更简洁有效的LPR筛查方法来诊断CRS患者是否存在LPR.通过检测鼻腔分泌物中胃蛋白酶的结果表明,CRS组、LPR组及健康组胃蛋白酶阳性率差异有统计学意义,而且胃蛋白酶检测比三联诊断LPR灵敏度高,因此以鼻腔分泌物中胃蛋白酶浓度为诊断标准,对LPR具有较高的诊断价值,可以进一步在临床上推广应用.

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（收稿日期：2013-10-21本文编辑：郭静娟）