乙型肝炎血清标志物的不同方法学检测结果评价

点赞:12210 浏览:47671 近期更新时间:2024-02-07 作者:网友分享原创网站原创

摘 要:目的:对时间分辨免疫荧光法、酶联免疫吸附试验、化学发光法检测乙型肝炎血清标志物的检测结果进行评价分析,评价不同方法学的检测结果是否具有一致性.

方法:用酶联免疫吸附试验、时间分辨免疫荧光法、化学发光法分别测定经乙型肝炎病毒DNA定量检测阳性患者的HBsAg水平,分析三种方法的检测灵敏度和和精密度.

结果:化学发光法测定灵敏度较酶联免疫吸附试验法和时间分辨免疫荧光法测定灵敏度高,三种方法用于低浓度HBsAg检测时,化学发光法的阳性检出率较酶联免疫吸附试验和时间分辨免疫荧光法均高,差异明显,P<0.05,差异具有统计学意义.

结论:化学发光法具有检测灵敏度高、对HBsAg阳性检出率高的特点,其优势尤其在检测低浓度HBsAg时体现更充分,值得临床作为低浓度HBsAg检测时推广应用.

关 键 词:乙型肝炎血清标志物酶联免疫吸附试验(ELISA)时间分辨免疫荧光法(TRFIA)化学发光法(CLIA)

【中图分类号】R-1【文献标识码】B【文章编号】1008-1879(2012)10-0244-01

乙型肝炎(乙肝)是在感染了乙肝病毒(HBV)后,所引起的危害较为严重的病毒性肝炎.据调查显示,在我国人群中,有60%的人感染过乙型肝炎病毒,其中10%为乙型肝炎表面抗原(HbsAg)携带者,每年乙型肝炎的新发病人数约有50万,不仅严重影响了人们的健康,而且给社会、家庭造成经济负担.测定乙型肝炎病毒血清标志物已经在国内广泛开展,它不仅在检测稳定性和灵敏度大大提高,给临床上的诊断带来好处.临床上常用乙肝血清标志物作为诊断乙肝病毒感染与否的诊断标准,本资料采用ELISA(酶联免疫吸附试验)、(TRFIA)、(CLIA)三种方法对经乙型肝炎病毒(HBV)DNA定量检测的阳性患者的HBsAg水平进行检测,分析三种方法的检测灵敏度和精密度.

1对象和方法

1.1对象.临床样本先经乙肝病毒DNA定量聚合酶链反应方法进行检测呈阳性,然后采用电化学光反应检测方法遴选下列模式:1~50HBsAgCOI临床样本30例,小于1HBsAgCOI的临床样本30例,其中男26例,女34例,患者年龄从18岁至55岁不等.

1.2检验方法.按照试剂盒说明书进行酶联免疫吸附试验测定,按照罗氏ABI7300全自动电化学发光仪和配套试、酶标仪等仪器设备使用说明书及检验科相关准操作程序进行样品检测.

1.2.1灵敏度实验.取国家临检中心提供的临界值血清稀释成不同的浓度,采用用化学发光法,酶联免疫吸附试验法及时间分辨免疫荧光法分别重复测定5次,统计测定结果,统计测定结果.

1.2.23种方法重复性取1.2.1步骤稀释的HBsAgCOI处于1~50的临床样本30例,分别采用化学发光法,酶联免疫吸附试验法及时间分辨免疫荧光法分别重复测定5次,统计测定结果,统计测定结果.

1.2.3临床样本的检测.采用化学发光法,酶联免疫吸附试验法及时间分辨免疫荧光法分别测定60例患者的HBsAg水平并与电化学光反应检测的结果进行对比.

乙型肝炎血清标志物的不同方法学检测结果评价参考属性评定
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1.3统计学方法所有收集的检测数据均用SPSS17.0统计分析软件包进行处理.计量数据以X±S表示,采用配对t检验,计数数据采用X2检验.且P<0.05为对比差异有统计学意义.

2结果

2.1三种方法的检测灵敏度.CLIA法灵敏度较ELISA法和TRFIA高.


2.2ECLIA法、ELISA法及胶体金法测定HBsAg各模式的结果.采用不同的检测方法,对乙型肝炎疑似患者进行乙肝血清标志物检测,CLIA法较ELISA法及TRFIA法对于低浓度的HBsAg检出率较高,差异显著,P<0.05,有统计学意义.

3讨论

有资料显示,全球目前有乙型肝炎病毒携带者近3亿,我国乙型肝炎携带者为0.93亿,是世界上几个乙肝高发国之一.乙肝血清标志物作为临床诊断乙肝患者的诊断标准,其检测方法一直以来受到临床技术人员的高度重视,其从最早的免疫扩散试验、对流免疫电泳试验发展到现在的酶联免疫吸附试验、时间分辨免疫荧光法、化学发光法、聚合酶链反应(PCR)检测及更高层次的免疫PCR检测方法[1].期间淘汰了一些灵敏度和精密度均较差的检验方法,目前,临床较常使用的是酶联免疫吸附试验、时间分辨免疫荧光法、化学发光法三种方法[2].乙肝病毒患者的早期诊断对治疗效果及预后的影响很大,早期患者的HBsAg一般较低,能找到合适的方法对低浓度的HBsAg进行检测,对早期乙肝患者的发现具有重大的临床意义[3].