PCNA在非小细胞肺癌组织中的表达临床意义

【摘 要 】 目的：探讨PCNA在非小细胞肺癌组织中的表达与临床意义.方法：选取本院2008年6月-2010年7月手术切除非小细胞肺癌组织蜡块76例作为观察组,同时选取正常肺组织24例作为对照组,采用免疫组化SP法对两组组织中PCNA表达情况进行检测.结果：观察组PCNA阳性率显著高于对照组（P<0.05）,Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ期患者PCNA阳性率间差异无统计学意义（P>0.05）,PCNA阳性者1年及3年生存率均显著低于PCNA阴性患者（P<0.05）.结论：PCNA高度表达是对非小细胞肺癌患者预后造成影响的重要因素,其异常表达和肺癌发病、进展与转移间有密切关系,可作为肺癌恶性程度与预后准确判断的重要指标.

【关 键 词 】 非小细胞肺癌； PCNA； 表达

肺癌是起自肺支气管与肺泡上皮细胞中的临床常见疾病,属于恶性肿瘤,对人类健康与生命有严重威胁,且已成为全球范围内恶性肿瘤中第一致死疾病[1].肺癌发病机制较为复杂,其发病及发展过程中有许多基因参与其中[2].非小细胞肺癌是肺癌常见类型,在所有肺癌中占比高达80%以上[3].增殖细胞核抗原（PCNA）属于DNA多聚酶辅助蛋白,已有临床研究证实,PCNA可对细胞增值活性予以直接反映,是DNA复制中必不可少的附属蛋白,可对DNA增值发挥重要调节作用[4],其含量变化和细胞增值间具有一定联系.为对PCNA与非小细胞癌发病及发展间的关系进行深入探讨,笔者选取本院手术切除非小细胞肺癌组织蜡块76例,同时选取正常肺组织24例,利用免疫组化SP法对两组组织中PCNA表达情况进行分析,现将相关情况报道如下.

1.资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2008年6月-2010年7月手术切除非小细胞肺癌组织蜡块76例作为观察组,所有标本均为手术过程中切取,且已经病理确诊.其中男42例,女34例,患者年龄为35～81岁,平均为（56.7±4.6）岁；其中腺癌29例,鳞癌43例,腺鳞癌4例.根据国际抗癌联盟（UICC）于1997年制定的TNM分期标准进行分级,其中Ⅰ期18例,Ⅱ期33例, Ⅲ期25例.所有患者在手术前均未接受放疗、化疗或免疫治疗.手术中同时在距离肿瘤至少5 cm处取健康肺组织24例作为对照组.

1.2 方法 采用免疫组化SP法对两组组织中PCNA表达情况进行检测.SP试剂盒由北京中山生物技术有限公司生产,鼠抗人PCNA单克隆抗体由迈新公司生产,严格按照说明书展开操作,具体操作步骤为：对切片行脱蜡水化,利用3%H2O2在室温下进行5～10 min孵育,置于高压锅中行抗原修复；将一抗滴入其中,于4 ℃环境下静置过夜,第2天加入二抗,在37 ℃下进行20 min孵育；用DAB进行显色处理,以苏木素作为标准对比染色结果,利用树脂进行封片.

1.3 判定标准 通过对PCNA蛋白染色结果分析对检测结果进行判定.PCNA阳性：染色部分位于细胞核上,为褐色或棕色染色,且染色方式为弥漫型或颗粒型（其中颗粒型较为常见）；阴性：切片中未见阳性细胞.

1.4 统计学处理 利用统计学分析软件SPSS 14.0对相关数据进行统计学分析,计数资料采用 字2检验.P<0.05为差异有统计学意义.

2.结果

2.1 两组间PCNA表达情况对比 所有PCNA表达均于细胞核中均匀分布,阳性表达为细胞核中有棕颗粒物出现.对照组PCNA阳性率为8.33%（2/24）,观察组PCNA阳性率为72.37%（55/76）,观察组PCNA阳性率显著高于对照组（P<0.05）.

2.2 不同分期中PCNA表达情况 在76例非小细胞肺癌组织标本中,Ⅰ～Ⅱ期共51例,经检测PCNA阳性36例,阳性率为70.59%；Ⅲ 25例,经检测PCNA阳性19例,阳性率为76.00%.Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ患者PCNA阳性率间比较差异无统计学意义（P>0.05）.

2.3 PCNA阳性与阴性患者1年及3年生存率对比 对观察组76例患者展开为期3年随访,对1年生存率及3年生存率进行记录.其中 55例PCNA阳性患者1年生存率为52.73%（29/55）,3年生存率为16.36%（9/55）；21例PCNA阴性患者1年生存率为80.95%（17/21）,3年生存率为38.10%（8/21）.对比可知,PCNA阳性患者1年及3年生存率均显著低于PCNA阴性患者（P<0.05）.

3.讨论

PCNA也叫做周期素,属于酸性核蛋白,其分子量为36 KD.PCNA是对细胞增值活性予以直接反映的重要标志物,可在细胞增殖过程中,对G1期向S期过渡阶段发挥调节作用,可对DNA前导链与后随链合成予以协调,和细胞核增殖关系密切,可作为对细胞增殖状态予以衡量的重要客观指标[5-6].通常情况下,当肿瘤细胞分化程度较低时,其增殖能力相对较强,此时PCNA表达也相对较强.因此,PCNA表达可对肿瘤细胞DNA复制活跃程度予以直观反映,从而对肿瘤恶性程度予以显示.

肺癌组织中细胞增殖活性较为旺盛,因此其PCNA含量与正常细胞相比明显增高.在本组研究中,对照组PCNA阳性率为8.33%,观察组PCNA阳性率为72.37%,观察组PCNA阳性率显著高于对照组（P<0.05）,由此可知在肺癌组织中有显著增殖上调现象.同时,本次研究发现,虽然Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ期患者PCNA阳性率间差异无统计学意义（P>0.05）,但随着临床分期推移,非小细胞肺癌组织中淋巴结的转移范围会不断扩大,PCNA阳性表明肿瘤增殖具有较高活跃性.在76例非小细胞肺癌组织中,PCNA阳性者1年及3年生存率均显著低于PCNA阴性患者（P<0.05）.由此可见,PCNA阳性表达说明患者预后相对较差.

因为非小细胞肺癌组织中PCNA阳性表达提示肿瘤细胞有旺盛增殖能力,这说明PCNA阳性表达水平和是否发生淋巴结转移与肺癌分化程度间有密切联系[7-9].因此,PCNA表达可在肺癌患者接受个体化治疗中发挥重要指导作用,同时有利于肿瘤预后判断工作.在非小细胞肺癌患者病理分期为Ⅰ～Ⅲ期、可行手术切除治疗时,应展开分子靶向药物、手术治疗与化疗的综合治疗过程.在术前应利用经皮肺穿刺及气管镜活检等方式对病理予以明确,同时利用免疫组化SP法对患者PCNA表达水平进行检测.若检测结果显示PCNA为阳性表达,则提示患者肿瘤恶性程度相对较高且预后较差.因此在患者无绝对禁忌证时,手术治疗对其肿瘤分期降低或远期生存率提高有重要意义.

总之,PCNA高度表达是对小细胞肺癌患者预后造成影响的重要因素,其异常表达和肺癌发病、进展与转移间有密切关系,可作为对肺癌恶性程度与预后进行准确判断的重要指标.