网站原创摘 要：目的：探讨粪便标本的微生物检验措施.方法：通过在实验室化验,掌握粪便的基本属性和状况,总结出系统的检验措施.结论：科学准确的粪便检测措施,才能了解和掌握粪便的医学特点,为有效的控制和预防相关疾病提供可靠的依据.
关 键 词：：粪便；微生物；检验
【中图分类号】R446.13【文献标识码】B【文章编号】1672-8602（2014）01-0195-01
粪便是人或动物的食物残渣排泄物.粪便的四分之一是水分,其余大多是蛋白质、无机物、脂肪、未消化的食物纤维、脱了水的消化液残余、以及从肠道脱落的细胞和死掉的细菌,还有维生素K、维生素B.
1形成
食物在大便标本（2张）胃和肠道内进行消化、主要是各种消化酶的作用.结肠不产生酶,只有细菌起消化作用.结肠内有多种细菌,大肠杆菌70%,厌氧杆菌20%,还有链球菌、变形杆菌、葡萄球菌、乳杆菌、芽胞和酵母.另有极少原生动物和螺旋体.肠细菌的重要作用是能产生生理需要的物质,如食物缺乏维生素时可在肠内合成维生素K、维生素B1、B2、维生素H、维生素B12、B6、蔚酸,叶酸和消旋泛酸.
2临床意义
2.1肠道病原菌可引起人类感染性腹泻,也可由细菌代谢产物造成食物中毒,长期应用抗生素导致菌群紊乱也可引起严重腹泻,因此,应及早作出诊断,以免延误治疗.
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2.2健康人体肠道内有许多正常菌群寄居,包括大量厌氧菌和大肠杆菌,肠杆菌等.
2.3肠道致病菌主要有沙门菌、志贺菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌、小肠结肠炎耶尔森菌、空肠弯曲菌、金葡萄球菌、难辨梭菌、白念珠菌、结核分枝杆菌、气单胞菌、邻单胞菌和蜡样芽胞杆菌.
2.4致病性大肠杆菌包括5种类型肠毒素型大肠杆菌（ETEC）、肠侵袭型大肠杆菌（EIEC）、肠致病型大肠杆菌（EPEC）、肠出血型大肠杆菌（EHEC）和肠凝聚型大肠杆菌（EAggEC）.志贺菌属是肠杆菌科中引起人类感染性腹泻最常见的致病菌之一,主要引起人类细菌性痢疾,其中福氏和宋内志贺菌最为常见.菌痢主要有三种临床类型：急性细菌性痢疾、慢性细菌性痢疾和携带者.典型的急性菌痢初期为水样便,数日后为脓血便,伴有里急后重现象.
2.5沙门菌有较强的内毒素,可使体温升高,白细胞减少.主要通过污染食品和水源经口感染,临床上表现主要为三种类型：
2.5.1肠热症：表现为发热,血培养或肥达反应阳性.
2.5.2胃肠炎：此型最常见,引起轻型和爆发型腹泻,伴有低热,恶心和呕吐.
2.5.3菌血症和败血症：多发生于儿童和免疫力低下的成年人,病原菌随血至组织,导致脑膜炎、心内膜炎、胆囊炎、骨髓炎等.往往出现血培养阳性而粪便培养阴性.
2.6出血性大肠杆菌引起严重的出血性肠炎,可发生在任何年龄,年龄小和老者死亡率高.少数患者并发溶血性尿毒综合征（HUS）.临床表现为低热,痉挛性腹泻,开始水样便,继而血样便.此病的诊断完全依靠细菌学检查,生化特征为不发酵山梨醇,可进行筛查[1].
3标本要求
3.1粪便标本虽然含有多种杂菌,但应尽量使用无菌容器,采集新鲜粪便做培养.
3.2标本最好在用药前采集.
3.3腹泻患者应尽量在急性期采集标本（3天以内）,以提高阳性率.
3.4采集脓血或黏液部分的新鲜粪便2～3g,液状粪便应挑取絮状物2～3ml.
3.5不易获得粪便时,可采用直肠拭子采样,即用无菌棉拭子经生理盐水湿润后,插入肛门内4～5cm（幼儿2～3cm）处,轻轻转动后取出,然后将拭子置于运送培养基或无菌试管内.
3.6标本置于无菌盒内、运送培养基或增菌培养基中立即送检.
3.7检查粪便中难辨梭菌,标本应尽量避免与空气接触,将标本置于密封盖试管中,量约试管2/3高度.
4仪器
25℃孵箱和37℃孵箱.
5试剂
（1）XLD琼脂平皿粪便标本中常见病原菌在XLD琼脂平皿上生长为红色或有黑心菌落.（2）山梨醇琼脂平皿大肠杆菌（0157）在山梨醇平皿上生长,利用山梨醇为无色透明菌落.（3）CCFA琼脂平皿选出艰难梭状芽胞杆菌.（4）庆大霉素平皿查霍乱弧菌.（5）碱性蛋白胨水查霍乱弧菌.（6）赛保罗平皿查真菌.（7）沙门菌、志贺菌及大肠杆菌Ol57：H7鉴定血清.
6操作步骤
6.1志贺菌属检验粪便标本-XLD平皿,37℃孵箱培养过夜-挑取可疑菌落（红色）转种克氏双糖培养基过夜-乳糖（-）、葡萄糖（+）、产气（-）、H2S（-）、动力（-）-志贺菌血清凝集和药敏试验-报告.
6.2沙门菌属检验：粪便标本-XLD平皿,37℃孵箱培养过夜-挑取可疑菌落（红色、或有黑心）转种克氏双糖培养基培养过夜-乳糖（-）、葡萄糖（+）、产气（+）、H2S（+）、动力（+）-沙门菌血清凝集和药敏试验-报告.
6.3大肠杆菌Ol57：H7检验粪便标本-山梨醇平皿,37℃孵箱培养过夜-挑取可疑菌落（无色、透明）转种克氏双糖培养基培养过夜-乳糖（+）、葡萄糖（+）、产气（+）、H2S（-）、动力（+）-大肠杆菌Ol57：H7凝集试验-报告.
6.4霍乱弧菌检验取米泔样粪便2ml,接种于碱性蛋白胨水中,35℃增菌6小时后,取表面生长物或菌膜,用划线分离法接种庆大霉素平皿,35℃培养18～24小时,观察有无灰青色菌落,挑取可疑菌落与霍乱弧菌01和0139诊断血清分别做玻片凝集试验[2].
6.5难辨梭状芽胞杆菌检验：取送检试管中深部的液状粪便接种CCFA平皿,35℃厌氧环境培养48小时后,挑选不透明,,边缘不整齐的粗糙型菌落,做革兰染色,如看到革兰阳性杆菌且次极端有卵圆形芽胞,做进一步生化鉴定.