血吸虫病的免疫学检验方法

摘 要：目的：探讨分析血吸虫病的免疫学检验方法.

方法：对目前较为常用的4种血吸虫病的免疫学检验方法进行对比,4种方法分别为皮内试验、环卵沉淀试验、酶联免疫法和间接凝血试验,对比4种方法检验的敏感性和各自的优势和劣势.

结果：我们的试验结果显示4种方法检测血吸虫病的阳性率分别为皮内试验94.30%、环卵沉淀试验96.80%、酶联免疫法98.10%、间接血凝试验92.70%,4种方法的阳性率进行比较发现差异不明显,P>0.05,不具有统计学意义.

结论：4种方法都具有较高的检查敏感性,但又各具特点,在实际应用中应该灵活结合努力发挥每种方法最大的优势,使其为临床诊断提供更为可靠和准确的结果.

关 键 词：血吸虫病免疫学检验阳性率临床诊断

【中图分类号】R9【文献标识码】B【文章编号】1671-8801（2013）11-0536-02

血吸虫病是一种严重的寄生虫病对人体危害极大,血吸虫的传染源为哺乳类动物,常见的感染情况为人畜共患.感染人群一般都是接触了被污染的疫水、土壤、食物等进而患病[1].病虫感染宿主后通常会有一段潜伏期,因而临床及时有效的诊断是提高患者治愈率的关键.感染后患者常会出现咳嗽、咯血、发热、嗜酸性粒细胞增加等症状,如果患者静脉壁受损还可能发生血栓.临床诊断时医生除了观察患者的具体症状,还要结合实验室检测、免疫学检测、超声检测等结果做出最终判断[2].我们对目前较为流行的4种血吸虫病的免疫学检验方法（皮内试验、环卵沉淀试验、酶联免疫法和间接凝血试验）进行对比分析,现将结果报道如下.

1资料和方法

1.1背景资料.选取成熟血吸虫的虫卵作为研究对象,由于虫卵内部毛蚴的分泌排泄物抗原性较强,因而可以和血吸虫宿主的血清相作用进而形成特异性的沉淀物质.

1.2试验方法.对目前较为常用的4种血吸虫病的免疫学检验方法进行对比,4种方法分别为皮内试验、环卵沉淀试验、酶联免疫法和间接凝血试验,具体试验方法如下.

1.2.1皮内试验.按照1∶3000的比例制备新鲜成虫匀浆,使用无菌注射器和皮试针头对受试者进行皮试注射,注射剂量为0.05ml.注射完毕后等待15分钟观察结果,具体为检查受试者的注射部位是否出现丘疹,如果出现要测量其最大直径,最大直径大于或等于1.0cm的为阳性反应.

1.2.2环卵沉淀试验.抽取受试者的血液样本进行离心处理获得血清,用融化的石蜡在干净的载玻片上划2道间距约为20mm的直线,待石蜡干燥后在2道线间滴加2滴受试者的血清.然后再向血清中加入约100个干燥的虫卵混匀,覆上盖玻片并用石蜡密封四周.将玻片置于温箱中培育48小时后在显微镜下观察结果.根据虫卵周围出现的沉淀物的大小进行阳性判断.

1.2.3酶联免疫法.首先制备实验组,使用日本血吸虫可溶性虫卵粗抗原（1∶3000）包被聚苯乙烯板,在4℃的温箱内过夜培育,第二天进行冲洗再加入受试者的血清样本（1∶200,吐温-PBS稀释）,按照同样的方法制备对照组,对照组不加血清样本.最后向实验组和对照组中加入底物进行显色处理,并使用酶标比色计读取吸光度值.

1.2.4间接凝血试验.先在U型微量血凝板的第一排的第一孔、第二孔、第三孔和第四孔内分别滴加0.9%的氯化钠溶液,再向第一孔加入血清样本混匀,对第二、三、四孔依次根据递减稀释法进行滴加.在第三孔和第四孔内加入稀释后的致敏红细胞悬液,旋转震摇混匀后在室温下静置1小时后观察记录结果.根据四个孔内的阳性反应情况判断是否为血吸虫病患者.

1.3统计学方法.使用SPSS19.0对所有数据进行处理,统计分析方法使用卡方检验和ANOVA,P<0.05,为差异统计学显著.

2结果

我们的试验结果显示4种方法检测血吸虫病的阳性率分别为皮内试验94.30%、环卵沉淀试验96.80%、酶联免疫法98.10%、间接血凝试验92.70%,见表1.

对皮内试验、环卵沉淀试验、酶联免疫法和间接凝血试验的阳性率进行比较发现差异不明显,P>0.05,不具有统计学意义.

3讨论

血吸虫病是一种严重的寄生虫类疾病,根据世界卫生组织1995年的统计数据显示,全球受该病威胁的人口达6亿多,其中感染人口接近2亿.可以感染人体的血吸虫主要为曼氏血吸虫、埃及血吸虫、日本血吸虫、间插血吸虫、湄公血吸虫和马来血吸虫等,我国是该病的高发区域,发病人群主要集中在长江流域和南方一些地区[2].

血吸虫的传染源为哺乳类动物,常见的感染情况为人畜共患,多种因素都可以影响血吸虫病的流行,如气温、水源、土壤、人口流动、社会制度等.一般而言,感染人群都是接触了被污染的疫水、土壤、食物等进而患病.感染后患者常会出现咳嗽、咯血、发热、嗜酸性粒细胞增加等症状,如果患者静脉壁受损还可能发生血栓.临床诊断时医生除了观察患者的具体症状,还要结合实验室检测、免疫学检测、超声检测等结果做出最终判断[3].

对血吸虫病的免疫学检测通常采用血吸虫尾蚴和虫卵制备抗原,目前较为常见的方法包括皮内试验、环卵沉淀试验、酶联免疫法、间接血凝试验4种方法.我们对4种方法的阳性率进行对比,结果发现差异不明显,4种方法的阳性率均可达90%以上,说明都具有较高的敏感性[4].临床通常使用皮内试验进行普通过筛,对出现阳性的可疑人群进一步检查.这种方法还可以用于检查低龄人群是否出现新的感染以考核防治的效果.皮内试验对肺吸虫有部分的交叉反应.该法也不适用于药物疗效的考核,因为患者在治愈后的较长时间内仍会显示阳性反应.对于治愈患者使用环卵沉淀反应进行检测会发现反应强度逐渐减弱,因而可以考核疗效.环卵沉淀反应对丝虫病、肺吸虫等患者的血清有较强的交叉反应.这种方法常被用于流行疫区治疗效果的评价.酶联免疫法的检测优势在于和一般常见的寄生虫没有明显的交叉反应.间接血凝试验也可以反映治愈患者的血清变化情况,但是由阳性转阴的速度比较缓慢,该法对肺吸虫患者的血清也有部分交叉反应[5].

由此可见4种方法都具有较高的检查敏感性,但又各具特点,在实际应用中应该灵活结合努力发挥每种方法最大的优势,使其为临床诊断提供更为可靠和准确的结果.