畜牧兽医毕业文模板江苏

学校代码:10223分类号:学 号:密 级:

硕士学位论文

论 文 题 目

研 究 生::::培养学院:

中国·大庆

20**. **

University code:10223Classified code:Graduate number:Confidential degree:

Heilongjiang Bayi Agricultural University

Master Dissertation

Dissertation Title

Postgraduate:Supervisor::esearch direction:College:

Daqing China

****, 20**

独创性声明

本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果.尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得黑龙江八一农垦大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料.与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意.

研究生签名:: 年 月 日

关于论文使用授权的说明

本人完全了解黑龙江八一农垦大学有关保留,使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印,缩印或扫描等复制手段保存,汇编学位论文.同意黑龙江八一农垦大学可以用不同方式在不同刊物上发表,传播学位论文的全部或部分内容.

(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)

研究生签名: 导师签名:: 年 月 日: 年 月 摘 要

[背景]

[方法]

[结果]

[结论]

关 键 词 :

Abstract

目 录

第一章 文献综述11

1.111

1.211

1.311

第二章 构建重组菌疫苗11

2.1 11

2.1.111

2.1.211

第三章 重组菌免疫保护性研究11

3.111

3.1.211

3.211

第四章 讨论11

4.1 11

4.1.2 11

4.2 11

第五章 结论11

5.1 11

5.1.211

5.211

参考文献 11

致谢11

附录11

个人简历11

符号说明

符号英文全称中文全称AaAmino acid氨基酸AbAntibody抗体APSammonium persulfate过硫酸铵DDays天DNADeoxyribonucleic acid脱氧核糖核酸DMSODimethyl Sulphoxide二亚砜DTTDithiothreitol二硫苏糖醇ELISAEnzyme-Linked Immunosorbnent Assay酶联免疫吸附试验EDTAEthylene diamine tetraacetic acid乙二胺四乙酸H或HisHistidine组氨酸IPTGIsopropylthio-β-D-galactoside异丙基-β-硫代半乳糖苷KanKanamycin卡那霉素LBLuria-Bertani mediumLB培养基PBSPhosphate buffered saline磷酸盐缓冲液PBSTPhosphate buffered saline with Tween20加入吐温20的磷酸盐缓冲液PEGPolyethylene glycol聚乙二醇BSABovine serum albumin牛血清白蛋白McAbMonoclonal antibody单克隆抗体HRPhorseradish peroxidase辣根过氧化物酶DAB3,3'-diaminobenzidine hydrochloride3,3'-二氨基联苯胺TMB3,3',5,5'-tetramethyl benzidine四联苯胺SDSSodium dodecyl sulphate十二烷基硫酸钠LBLuria-Bertani mediumLB培养基NCnitrocellulose membrane硝酸纤维膜TEMEDN, N, N', N'-tetramethyl ethylene diamineN, N, N', N'-四乙二胺TrisTrischydroxymethy三羟氨基乙烷

1.1 引言

奶牛炎Mastitis)是奶牛乳腺组织炎症,是一种较为复杂而且常见的疾病,给世界奶牛业造成了巨大的损失引起奶牛炎的因素很多,主要为病原微生物感染.引起奶牛炎的病原微生物有细菌,真菌,霉形体和病毒等,150多种,且不同地区流行的病原微生物种类也不同.临床上常见的主要致病菌包括金葡萄球菌,大肠杆菌,无乳链球菌,停乳链球菌等,约占整个炎病例的~90%.

1978年美国炎委员会National Mastitis Council)根据和乳汁是否出现肉眼可见变化,将炎分为临床型炎Clinical mastitis)和隐性炎Hidden mastitis).临床型炎造成奶牛产奶量下降,严重时病牛乳区肿胀硬化,化脓甚至萎缩,失去泌乳能力而被迫淘汰据报道,临床型炎占奶牛总发病的21%~23%每年全世界大约有10%的病牛因而淘汰[1].隐性炎是指和乳汁都肉眼可见变化,需要特殊的检测手段才能检出的炎隐性炎在牛群中更加普遍,占发病数的75%~95%[2].即使在一些饲养水平较高的发达国家,隐性炎的发病率也在50%以上.~75%[3].隐性炎的临床症状不明显,饲养者不容易发现,因此隐性炎导致的损失远大于临床型炎.

多年来人们一直积极防治奶牛炎,但是奶牛炎的发病率并没有显着地下降,仍然是引起业经济损失最大的疾病.耐抗生素菌株增加,导致抗生素疗法效果越来越差

1.2 奶牛炎的研究进展

引起奶牛炎的因素较多,不同地区的发病情况也不一样,但总结起来引起奶牛炎的主要因素为:饲养因素,奶牛自身因素和病原微生物等.

1.2.1

饲养因素包括:饲养者对奶牛炎的重视程度,奶牛的营养水平以及环境因素.对奶牛炎的重视程度表现在免疫治疗,挤奶设备或人工榨乳,牛舍的设计,垫料的使用等多个方面.多数养殖场和散户忽视了对奶牛炎的免疫对隐形奶牛炎的防治,直到发展成为临床型奶牛炎才治疗.同时挤奶设备或人工榨乳容易诱发炎的交叉感染.不科学的牛舍设计不适时更换垫料奶牛生活环境较差,容易滋生各种病原菌,从而大大增加了奶牛的感染几率.饲的成分比例会增加奶牛炎的发病率.过量的蛋白质或氮类促使炎发病.奶牛最适宜的生活环境温度为15~22℃(适宜生活温度为5~28℃)据报道,炎发病具有明显的季节性,夏季高温潮湿炎的感染率最高,而春秋季凉爽则发病率次之,冬季寒冷不利细菌繁殖则发病率最低.炎有地域性,南方地区炎的发病率明显高于北方地区.

第二章 构建重组菌疫苗

2.1 材料2.1.1菌株,质粒和单克隆抗体

大肠杆菌DH5α购自北京全式金生物技术有限公司.质粒pKD46,pKD3由扬州大学朱国强教授惠赠,质粒pET30a(+)/TRAP由黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院细胞生物学实验室构建保存,pMD18-T载体质粒购自TaKaRa宝生物工程(大连)有限公司.

抗TRAP的单克隆抗体由本实验室周雪提供,抗链球菌GapC1的单克隆抗体由本实验室张丽萌提供.

2.1.2主要试剂和仪器

等等等

2.1.3 *****方法

等等等

2.2 结果与分析

图2-1 引物位置示意图

Fig2-1 Schematic presentation of the site of primers in genes

参 考 文 献

[1] Malinowski E, Gajewski Z. Mastitis and fertility disorders in cows[J]. Pol J Vet Sci, 2016,13(3): 555-560.

[2] Middleton J R, Luby C D, Adams D S. Efficacy of vaccination against staphylococcal mastitis: a review and new data[J]. Vet Microbiol, 2016,134(1-2):192-198.

[3] 马保臣,李建基,王春璈.奶牛急性乳腺炎病原菌的分离与鉴定[J].中国兽医杂志,2004,3(11):22-24.

[4] 马燕芬,王军,王瑞.奶牛炎病因分析及对策[J].山东畜牧兽医,2005,6(9):12-15.

[5] 吴铭秀.南方十二省市奶牛疾病主要防治经验[J].四川奶牛,1992(4):123.

[6] 杨克礼,刘士喜,朱先春,等.奶牛临床型炎病原菌分离试验[J].中国奶牛,2000,5(4):43-45.

致 谢

三年研究生生活是在尊敬的导师教授的陪伴下走过的,一路走来老师始终是我人生的方向标,不论是在学习还是生活上导师都给予我极大的帮助,理解,信任和支持,

附 录

主要试剂的配制

LB液体培养基(pH7.0)

胰蛋白胨 2 g

酵母抽提物 1 g

氯化钠 2 g

磁力搅拌器搅拌全部溶解后,用1 M NaOH调pH至7.0,加入去蒸馏H2O定容至200m L,121℃高压灭菌20 min.

LB液体培养基(pH7.0)

胰蛋白胨 2 g

酵母抽提物 1 g

氯化钠 2 g

琼脂粉 3 g

磁力搅拌器搅拌全部溶解后,用1 M NaOH调pH至7.0,加入去蒸馏H2O定容至200m L,121℃高压灭菌20 min.

氨苄青霉素溶液(Amp,100 mg/mL)

称取1 g氨苄青霉素粉末充分混合溶解在ddH2O中,定容至10 mL, 0.22 μm滤膜过滤除菌,分装标记后,-20℃保存.

氯霉素溶液(Cm,25 mg/mL)

称取0.25 g氯霉素粉末充分混合溶解在无水乙醇中,定容至10 mL,分装标记后,-20℃保存.

卡那霉素溶液(Kan,25 mg/mL)

称取0.25 g卡那霉素粉末充分混合溶解在ddH2O中,定容至10 mL, 0.22 μm滤膜过滤除菌,分装标记后,-20℃保存.

个人情况 民族:*出生年月:****年*月籍贯:**省****政治面貌:****

教育背景

2005.09-2016.06 黑龙江八一农垦大学 生命科学技术学院理学学士学位生物工程专业

2016.092016.06 黑龙江八一农垦大学 生命科学技术学院 理学硕士学位生物化学与分子生物学专业

经历

2016.09 –2016.12 黑龙江省农垦总局项目编号 参加人

2016.06 –2016.06 国家自然科学基金) 参加人

2016.06 –2016.06 黑龙江省研究生创新科研项目) 主持人在期间发表论文

1)**,**,**,**(通讯作者).奶牛炎金葡萄球菌对四环素耐药性分析学报2016,32(11):192-194

III

第一章 文献综述

7

用Red重组技术表面展示S. aureus TRAP的E.coli构建及其免疫原性

第二章 构建重组菌疫苗

- 参考文献

致谢

附录

个人简介

或博士

Or Doctor