网站原创摘 要 目的：检测成纤维生长因子受体（fibroblast growth factor receptors, FGFRs）在小鼠破骨细胞中的表达情况,为探讨FGFRs 对破骨细胞的直接调控作用奠定基础.方法：采用巨噬细胞集落刺激因子（macrophage colony stimulating factor,M-C）和破骨细胞分化因子（receptor activator of nuclear factor- B ligand,RANKL）诱导小鼠骨髓单核细胞分化为破骨细胞.提取细胞总RNA 后经逆转录获得小鼠破骨细胞cDNA,根据FGFRs基因编码区序列设计的引物进行PCR扩增并对PCR扩增产物进行测序.为进一步验证转录水平的结果,提取细胞总蛋白电泳后进行免疫印迹实验.结果：诱导5d 后可见TRAP（+）多核细胞出现,小鼠破骨细胞在转录水平和翻译水平均只可检测到FGFR1 和FGFR3 基因的表达产物.结论：M-C 和RANKL可成功诱导出小鼠破骨细胞,FGFR1 和FGFR3 基因在小鼠破骨细胞中均有表达.
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关 键 词 : 破骨细胞；成纤维生长因子受体；RT-PCR；Western blot