HLA基因系统与反复自然流产

【摘 要 】 反复自然流产是一种常见的妊娠并发症,病因极其复杂,其中不明原因者约占37%~79%.近几年研究表明,不明原因反复自然流产主要与免疫因素有关,而同种免疫型则主要与HLA的相容性有关.该文对近几年来不明原因反复自然流产与HLA基因系统的关系作以综述.

【关 键 词 】反复自然流产,HLA

反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)指有3次或3次以上的连续自然流产,其发生率约占育龄妇女1%～2%.目前已确定的RSA危险因素包括：胚胎染色体异常,子宫解剖结构异常,内分泌异常,生殖道感染,自身免疫性疾病,然而仍约37%～79%的原因不明[1].现代生殖免疫学认为,RSA的发生是母-胎之间免疫状态失衡导致免疫排斥的结果,而人体对移植物的排斥反应,主要由组织相容性复合体（MHC）基因调控,其中包括人类白细胞相关抗原（HLA）基因.国内外大量研究表明,不明原因RSA的发生与HLA基因系统有关,母-胎之间HLA系统相容性增加、母体封闭抗体减少及HLA在滋养层细胞中表达异常等均可导致RSA发生.现将HLA基因系统在不明原因RSA中的作用综述如下.

1.HLA基因系统

HLA基因位于人类染色体6p21-q23,是具有多基因性与多态性的紧密连锁的基因群,全长约4 000 kb,约占人类基因组总长度的1/3 000,是迄今已知人体最复杂的基因复合体,可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类基因区.Ⅰ类基因区包括经典的Ⅰ类基因HLA-A、-B、-C和非经典的Ⅰ类基因HLA-E、-F、-G、-H、-X等,其编码的Ⅰ类抗原存在于所有的有核细胞表面,负责呈递外来抗原给CD8+T细胞,近年来研究较多的是HLA-G与RSA的关系.Ⅱ类基因区由经典的Ⅱ类基因HLA-DP、-DQ、-DR和非经典的Ⅱ类基因HLA-DN、-DO、-DM等构成,其编码产物主要存在于成熟B淋巴细胞及抗原呈递细胞表面,负责将抗原呈递给CD4+T表面,参与免疫应答的启动和免疫调节,其与RSA的关系研究主要是经典Ⅱ类基因.Ⅲ类基因区位于Ⅰ类基因和Ⅱ类基因之间,由一些与补体和某些炎性因子编码相关的基因组成.

2.HLA抗原相容性与反复自然流产

正常妊娠是一种成功的半同种异体移植过程,需要母体免疫系统能识别胚胎父方来源的抗原,并引发正常免疫反应.如果胎母HLA组织相容性增大,母体免疫系统不能识别胚胎抗原,使胚胎遭受母体免疫系统的排斥,将会发生流产[2].李萍等[3]研究,流产夫妇双方HLA抗原相同频率明显高于对照组,说明共同的HLA抗原可能使胚胎与母体间共同具有滋养层/淋巴细胞交叉抗原,这种抗原相容的胚胎组织不能刺激母体产生保护性抗体或封闭因子,因而在植入宫腔后被排斥.

Takakuwa K等[4]为进一步说明对父方抗原缺乏适当的免疫反应,即夫妻间HLA抗原相容性增加,易致RSA,用PCR-RLFP方法检测91对RSA夫妇及72对正常生育夫妇的HLA-DRB1和DQB1基因型,发现RSA夫妇HLA-DRB1和DQB1位点有一个以上相同的夫妻数显著高于正常生育夫妇,提示夫妻间HLA-Ⅱ类抗原的相容性增加可能与不明原因RSA的发生有关.朱国平等[5]对夫妻HLA相容性增大的不明原因RSA患者采用丈夫静脉血B淋巴细胞注射,对妻子进行主动免疫3个月后,患者抗父体的淋巴细胞毒抗体（APCA）的阳性率明显增高,妊娠成功率增加,且具有降低不良反应的可能.这不仅支持RSA患者的胚胎抗原免疫低反应性的发病机理,也证实了主动免疫疗法的合理性.

3.反复自然流产的HLA易感基因

部分学者认为RSA与母体存在特异性的流产易感基因或单体有关,这种易感基因或单体可能存在于HLA复合体内或与其紧密连锁.含有易感基因或单体的母体对胚胎抗原呈低反应状态,同样不能产生封闭因子,使胚胎遭受母体免疫系统的排斥而发生流产[6].各国学者报道的流产易感基因或单体存在的位点或部位有所不同,这可能与种族特异性有关.国外学者对高加索人群研究结果表明：RSA的易感基因为DQB1*0501,单元型DQA1*0201-DQB1*0201、DQA1*0101-DQB1*0501、DQA1*0501-DQB1*0201与RSA的发生相关[7].Takakuwa K等[8]研究发现日本人群HLA-DRB1*1502等位基因是不明原因RSA的易感基因.Kruse等[9]在大样本的研究中发现：HLA-DRB1*03等位基因是不明原因RSA的易感基因.我国林其德等[10]研究上海人群不明原因RSA患者,发现DQB1*0604,0605等位基因与DQA1*01-DQB1*0604,0605单元型可能是该病的易感基因与易感单元型,而DQB1*0501,0502等位基因可能是防止该病发生的保护性因子.

4.HLA在滋养层细胞的表达与反复自然流产

胎儿绒毛膜外滋养细胞不表达经典Ⅰ类分子HLA-A、B,也不表达经典的Ⅱ类分子HLA-DQ、DR、DP,而表达非经典的Ⅰ类分子HLA-G、E及少量的HLA-C.HLA-G主要表达在具有侵蚀力的绒毛外滋养层细胞、胎儿血管内皮细胞和羊膜细胞,HLA-E主要表达于合体滋养层细胞、绒毛间质细胞、绒毛外滋养细胞,少数表达于蜕膜细胞[11].在IVF移植前的早期胚胎上清液中测定sHLA-G显示HLA-G对成功的妊娠结局是必要的[12].HLA-G促进胚胎的植入和胎儿胎盘发育的机理不清,研究显示[13],HLA-G与细胞粘连有关,它在胚泡与子宫内膜上皮细胞黏附,与蜕膜免疫细胞紧密接触,特别是与子宫自然杀伤细胞（uNK）紧密接触,阻止NK细胞对滋养层细胞的攻击.相反,如果滋养细胞缺乏HLA-Ⅰ类分子表达,可能易受NK细胞攻击,导致流产的发生.

HLA-GmRNA被选择性的剪接产生5种主要的分子形式,HLA-G1拥有全长的HLA-G分子,包含α1、α2、α3结构区域和细胞质的跨膜区；HLA-G2包括α1和α3结构区域；而HLA-G3只包含α1结构区域,HLA-G4包含α1、α2结构区域和细胞质尾区；sHLA-G1是修改的胞质尾区形式.最近的研究显示只有HLA-G1表达在滋养细胞表面具有生物学意义[14].HLA-G的核苷酸序列有较少的多态现象,提示HLA-G蛋白在不同人群化不大.尽管HLA-G的多态现象有限,但在RSA妇女中仍存在HLA-G核苷酸序列改变,早期研究由于样本量较小,在反复性流产妇女中没有发现HLA-G的多态性,然而现在许多研究已经显示,HLA-G*0105N,HLA-G*0104和HLA-G*0103与反复性流产有关[15].

在RSA中研究较多的是HLA-G,近年也有HLA-E的研究,HLA-G、E均能与杀伤抑制受体（KIR）相互作用使母体对胚胎免疫反应下降,有利于妊娠继续.Ripathi P等报道,HLA-E*0101等位基因在RSA中表达频率显著高于正常孕育妇女.

5.结束语

复发性流产的病因极其复杂,近年来研究RSA的发生主要与免疫因素有关,而同种免疫型则主要与HLA的相容性有关,通过HLA基因系统与RSA相关性的研究,使我们认识到易感基因、保护基因在RSA中的作用,更有利于对HLA易感基因,保护基因的进一步探讨,有利于阐明RSA发生的分子机制,并在此基础上制定全新的防治措施.