倍青口腔溃疡液提取工艺

【摘 要】目的优选倍青口腔溃疡液的最佳提取工艺.方法以提取液中没食子酸的含量以及总固体得率为指标,采用L9（34）正交试验方法优选倍青口腔溃疡液的渗漉提取工艺；以靛玉红的含量为指标,单因素考察青黛的浸泡时间.结果倍青口腔溃疡液最佳提取工艺为用50%乙醇浸渍3天,再以1ml/分钟的流速进行渗漉,收集渗漉液至总量80%；青黛用乙醇浸渍5天.结论倍青口腔溃疡液提取工艺合理、可行.

【关 键 词】倍青口腔溃疡液；没食子酸；靛玉红；HPLC；正交试验

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.09.598文章编号：1004-7484（2013）-09-5275-02

倍青口腔溃疡液是由邵阳市芙蓉口腔医院李教授多年研究的治疗口腔溃疡的有显著疗效的中药方剂.由五倍子和青黛等6味药组成.具有消炎止痛,去腐生肌之功效.用于治疗口腔溃疡.因方中各主要有效成分多溶于低浓度乙醇,故采用一定浓度的食用酒精为溶媒进行浸提,以所得总固体和没食子酸作为考察指标,采用L9（34）正交试验方法进行优选；再以靛玉红为考察指标,单因素考察青黛的浸泡时间,得出合理、可行的浸提工艺.

1仪器及材料

1.1仪器岛津LC-20A型高效液相色谱仪；AB204-N型电子天平、AG135电子天平,梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司.

1.2试剂甲醇和磷酸（色谱纯,SCRC国药集团化学试剂有限公司）,水为重蒸馏水,其余所用试剂均为分析纯.

1.3药材五倍子、青黛等药材均购于邵阳市神农中药饮片有限公司；没食子酸对照品（110813-200302,供含量测定用）和靛玉红对照品（110717-200204,供含量测定用）由中国药品生物制品检定所提供.

2方法与结果

2.1渗漉提取工艺考察

2.1.1总固体测定方法各精密吸取25ml,置已干燥至恒重的蒸发皿中,在水浴上蒸干后,于105℃干燥3小时,置干燥器中冷却30分钟,迅速精密称定重量.

2.1.2没食子酸含量测定[1]

2.1.2.1色谱条件色谱柱：UltimateTMXB-C9（4.6mm×250mm5μm）；柱温：35℃；流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液（15：85）；流速：1.0ml/min；检测波长：273nm；.进样量：10μl.

2.1.2.2对照品溶液的制备精密称取没食子酸对照品9.66mg,置50ml量瓶中,加50%乙醇至刻度,摇匀,精密吸取2ml,置10ml量瓶中,加50%乙醇至刻度,摇匀,作为对照品溶液（0.03864mg/ml）.

2.1.2.3供试品溶液的制备精密吸取本品5ml,精密加入5mol/L盐酸溶液20ml,称定重量,置水浴中加热回流1小时,放冷,称定重量,用5mol/L盐酸溶液补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液1ml,置100ml量瓶中,加50%甲醇至刻度,摇匀,即得.

2.1.3渗漉提取工艺试验[2]

2.1.3.1实验设计以浸渍时间、乙醇浓度、渗漉速率为考察因素,以所得总固体和没食子酸含量为考察指标,按L9（34）安排正交试验.因素水平见表1.

3结果与讨论

3.1方中五倍子为君药,其富含没食子酸,达50%以上[1],用HPLC法测定没食子酸含量的方法比较成熟,且考虑到HPLC法准确性好,精密度高,故选择五倍子中的没食子酸作为正交试验的一个考察指标.

3.2由于市场上所购青黛均为极细粉,渗漉时极易堵塞孔径,给试验造成极大困难；同时其主要有效成分靛玉红、靛蓝为脂溶性成分,曾考察过用50%乙醇作浸渍溶剂,所得靛玉红含量极低,改用乙醇后,靛玉红的转移率达70%以上.

3.3以上试验得出乙醇浓度和渗漉速率对渗漉提取工艺有显著性影响通过正交试验方差分析及整个工艺过程中既要考虑到最大限度的提取有效成分,又要考虑降低成本,操作简单,故确定倍青口腔溃疡液最佳提取工艺条件为用药材粗粉加50%乙醇浸渍3天,以1ml/min的速率进行渗漉,收集渗漉液至总量80%；青黛用适量乙醇浸渍5天,合并两种溶液,用50%乙醇调整至总量.并按该工艺试制研究,结果表明该工艺可行,重现性好,可操作性强.