网站原创摘 要目的:为了提出关于梅毒血清学试验筛选诊断梅毒程序的方法,对非特异性的心磷脂抗原实验(包括Trust试验)和梅毒特异性抗体检测(包括TPPA法,ELISA法)做进一步方法学的比较.方法:对2008年以来确诊为各期梅毒的阳性血清标本83例.每份标本同时用TRUST、TPHA、ELISA三种方法进行测定.同时进行室内质控.采用卫生部2008年室间质评作为标准,来保证结果可靠性.结果:TRUST试剂检测梅毒血清阳性率19.2%,TPPA法阳性率92.7%,ELISA法阳性率95.1%.TPPA与TP-ELISA方法比较,P>0.05,两种方法无统计学差异.TRUST与TP-ELISA,TPPA两种方法比较,P<0.01差异有显著性.结论:ELISA和TRUST法可作为常规检测梅毒血清学试验的常方法,阳性标本再用TPPA法进行确定.
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doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2009.20.228
材料与方法
试验材料:2008年以来在我院性病门诊就诊的梅毒患者治疗前的血标本83份.诊断依据GB15974-1995梅毒诊断标准及处理原则.
试剂与仪器:TRUST试剂盒,TPPA试剂盒,ELISA试剂盒.酶标仪,洗板机.
试验方法:TRUST、TPHA、ELISA的检测均严格按使用说明书操作.每份标本同时用TRUST、TPHA、ELISA三种方法进行测定.同时进行室内质控.还用卫生部2008年室间质评作为标准,来保证结果可靠性.
统计学处理:使用SPSS10.0软件进行统计.TPPA滴度与TP-ELISAS/CO值采用相关系数检验.
结果
TRUST试剂检测83例梅毒血清,阳性16例,阴性67例,阳性率19.2%.两种特异性抗体检测结果,TPPA法测定83例梅毒血清,77例阳性.6例阴性,阳性率92.7%.ELISA法测定83例梅毒血清,79例阳性,4例阴性,阳性率95.1%.TPPA与TP-ELISA方法比较,P>0.05,两种方法无统计学差异.TRUST与TP-ELISA,TPPA两种方法比较,P<0.01,差异有显著性.见表1.
讨论
ELISA是检测梅毒最常用的方法,属于特异性梅毒血清学试验.ELISA阳性的标本,表明标本中含有梅毒特异性抗体,是感染的标志.双抗原夹心ELISA螺旋体特异性抗体其结果为客观读取,易于保存,可以自动化、标准化、大批量同时检测,工作中对ELISA的室内质量控制也有更多的经验,故更宜采用.
TRUST是非特异性梅毒血清学试验的常用方法,但如果RPR滴度很低,低于1:4以下,不排除检测阳性的可能,因为一些年老人、感冒、风湿病等都可能导致检测阳性的现象.TRUST法为非特异性试验,存在一定的检测阳性或检测阴性结果,不易作为梅毒筛选试验,以免引起漏诊.TRUST阳性的患者往往是梅毒现症感染者,临床上即可开展治疗,并且随成功的治疗滴度逐渐下降,可以作为疗效观察的指标.
TPPA是梅毒的确认试验,检测特异性抗体,常用于筛检阳性标本的确认,具有特异性强、敏感性高,血清、血浆皆可用于检测的特点.但其结果为主观判断,不易保存,出具滴度结果时成本较高,反应时间较长,最少需要2小时以上,对操作人员的水平要求较高,不适于大批量的筛选试验.
ELISA阳性、TRUST阴性的患者,一般为梅毒既往感染者.一般说,如果RPR和TPPA/TPHA两个阳性,诊断成立,而ELISA法具有较好的特异性和敏感性,也有一定检测阳性.本文有2例老年手术患者,ELISA阳性、S/CO值在灰色区,TRUST,TPPA都为阴性,结合临床提示ELISA为检测阳性.本文的数据反映:ELISA与TPPA的检测结果具有较高的一致性(P>0.05),且无检测阴性结果.TRUST法与TPPA法检测结果差异有统计学意义(P<0.001),而ELISA与TPPA法差异无统计学意义(P>0.05).故作者常规检测梅毒血清学试验的常方法ELISA和TRUST法.阳性标本再用TPPA法进行确定.