高出检测限浓度的肿瘤标志物的准确值检测

【摘 要】目的为得到一个高出检测限浓度肿瘤标志物的具体值,而选择一种更好的稀释液对样本进行稀释,以满足临床对疗效观察的需求.方法分别采用三种不同的稀释剂:①美国雅培AXSYM全自动化学发光仪配套的第4号缓冲液,②生理盐水,③肿瘤标志物的阴性血清(每种被测肿瘤正常值低90%以下的血清),对美国雅培AXSYM全自动化学发光仪所测的高浓度肿瘤标志物CEA,CA125,T-PSA,进行稀释,与仪器自动稀释的结果和在仪器检测限内检测结果进行比较.结果手工稀释的结果与机器自动稀释的结果比较,CA125:4号缓冲液稀释与仪器自动稀释结果无显著差异,而用生理盐水和用阴性血清稀释与仪器自动稀释有统计学差异,CEA和T-PSA:三种稀释液与仪器自动稀释均无显著性差异.结论美国雅培AXSYM全自动化学发光仪配套的4号缓冲液,对超高浓度即仪器已经不能自动稀释的那部分肿瘤标志物的血清稀释的结果最好.CA125阴性血清由于基础值高,则不能用来对CA125进行稀释,但可以对CEA和T-PSA进行稀释,但是结果不如4号缓冲液和生理盐水准确.

【关 键 词】高出检测限浓度,CEA,T-PSA,CA125,4号缓冲液,生理盐水

Higherthanthedetectionlimitconcentrationoftumormarkersindetectionoftheexactvalue

QIANMing,YUANJun-jun,SHUXiao-chun.ClinicLaboratoryThe5thAffiliatedHospitalofSunYat-senUniversity,Zhuhai,519000

【Abstract】ObjectiveInordertomeettheneedsoftheclinicalobservationonthetherapeuticeffect,wehetoseekakindofbufferwhichwecanusetodilutethesamples,andthenwecangetthevaluesoftheserumconcentrationoftumormarkerswhicharetoohigherthanthedetectionlimitoftesters.MethodsWiththreevariousofdiluentssolutions:①NO.4buffer,②normalsaline,③negativeserumoftumormarkers.thetumormarkers:CEA,CA125andT-PSA,detectedbytheUnitedStatesAbbottAXSYMautomaticchemiluminescentinstrumentwhichwerehigherinserumconcentrationwerediluentedbyhand.ResultsComparisonwiththeautomaticdilutionbytheinstrument,thedifferenceof4buffer,salineandnegativeserum,therewassignificantstatisticdifferencebetweenthesamplesdilutedwithsalineandnegativeserumwhentestedCA125.Andtherewasnosignificantstatisticdifferencebetweentheothergroups.ConclusionTheno.4bufferasthecorollaryreagentoftheUnitedStatesAbbottAXSYMautomaticchemiluminescentinstrumenthasthebestdelutioneffect.Althoughthenegativeserumhasthepooresteffect,itcanbeusedtodiluteCEAandT-PSA.

作者单位:519000珠海市中山大学附属第五医院检验科

各种肿瘤的发生发病随着环境污染,食品污染,工作压力等等的因素呈上升趋势[1,2].而肿瘤标志物的广泛应用,其对肿瘤的诊断及疗效监测越来越重要[3].但由于仪器的线性范围有限,高出检测限浓度的肿瘤标志物结果的准确报告显得尤为重要.本实验对CEA、CA125、T-PSA三种肿瘤标志物高出检测限的标本进行不同稀释剂的稀释,从中选择一种最为准确的稀释剂,而更加准确地报告肿瘤标志物的具体检测值.满足临床医生对疗效地监测和观察.

1资料与方法

1.1标本来源15份标本为中山大学附属第五医院2009年12月至2010年元月住院及门诊患者,已经用美国雅培AXSYM全自动化学发光仪测得的高浓度肿瘤标志物的血清,即高浓度的CEA,CA125,T-PSA,的血清标本.阴性血清为:检测当天的健康体检血清标本,CEA<0.2ng/ml,取女性T-PSA<0.015ng/ml.

1.2实验仪器及方法仪器:美国雅培AXSYM全自动化学发光仪,加样(上海大龙医疗设备有限公司)

试剂:美国雅培AXSYM全自动化学发光仪配套试剂及配套4号缓冲液,生理盐水.

1.3标本采集用一次性真空抽血管抽取全血3ml,分离血清待测.

1.4统计学方法统计学处理采用SPSS11.5软件统计与分析,采用t检验.

2结果

2.1不同稀释液稀释样品后测定CA125的浓度,比较测定结果,见表1.

表1

不同稀释液处理样品CA125浓度的比较(U/ml)

样品编号仪器自动稀释4号缓冲液生理盐水阴性血清

1743.92746.00715.50978.50

2630.40632.40600.00845.10

3850.90853.20810.401132.30

41689.351680.541598.501965.20

52380.462375.252248.402983.60

4号缓冲液、生理盐水、阴性血清稀释样品的测定结果与仪器自动稀释测定的结果进行双侧配对t检验,所得P4号缓冲液等于0.544>0.05,P生理盐水等于0.034<0.05,P?阴性血清?=0.011<0.05.可见用4号缓冲液稀释与仪器自动稀释结果无显著差异,而用生理盐水和用阴性血清稀释与仪器自动稀释用统计学差异,不宜用这两者稀释样品以获得高出检测限的样品CA125浓度.

2.2不同稀释液稀释样品后测定CEA的浓度,比较测定结果,见表2.

表2

不同稀释液处理样品CEA浓度(ng/ml)的比较

样品编号仪器自动4号缓冲液生理盐水阴性血清

1182.56185.20189.71192.50

2256.14253.46260.35262.19

3310.25311.58312.70294.68

4358.23357.28355.10358.10

5427.13428.00430.35410.52

4号缓冲液、生理盐水、阴性血清稀释样品的测定结果与仪器自动稀释测定的结果进行双侧配对T检验,所得P4号缓冲液等于0.807,P生理盐水等于0.173,P阴性血清等于0.583.三者均>0.05,表明用这三种稀释液稀释高出检测限的样品CEA浓度与仪器自动稀释均无显著性差异.

2.3不同稀释液稀释样品后测定T-PSA的浓度,比较测定结果,见表3.

表3

不同稀释液处理样品T-PSA浓度的比较(ng/ml)

样品编号仪器自动稀释4号缓冲液生理盐水阴性血清

175.1274.3678.2379.56

2120.12119.80118.36124.56

3210.45209.95209.45206.48

4350.70351.64350.56353.70

5460.43458.90453.10468.45

4号缓冲液、生理盐水、阴性血清稀释样品的测定结果与仪器自动稀释测定的结果进行双侧配对T检验,所得P4号缓冲液等于0.340,P生理盐水等于0.448,P阴性血清等于0.181.三者均大于0.05,表明用这三种稀释液稀释高出检测限的样品T-PSA浓度与仪器自动稀释均无显著性差异.

3讨论

由于CEA>500ng/ml仪器不能自动稀释,T-PSA和CA125虽然可以自动稀释10倍,但是检测上限分别只有500ng/ml和6000U/ml,还是不能够满足临床的需要,本实验对这三种肿瘤标志物分别用美国雅培AXSYM全自动化学发光仪配套的第4号缓冲液,生理盐水,阴性血清(CEA<0.5ng/ml)(T-PSA<0.015)稀释检测,由于CA125正常男女性测量值通常都落在(5.0~30.0)U/ml之间,作为稀释剂本底太高.而CEA、T-PSA用正常人的血清作为稀释剂本底低影响就比CA125小很多,所以CEA,T-PSA用4号液和生理盐水及阴性血清稀释的效果都在可接受范围,但是用4号液稀释的结果最接近仪器自动检测和自动稀释的结果,且方便易得,生理盐水次之,阴性血清随着所取的阴性血清的测量值越低就越接近仪器自动检测和自动稀释的结果,但还是比前两种误差大.且获得要求的阴性血清较获得4号液和生理盐水来的麻烦,且误差也大于前两者,综上所诉:4号缓冲液是最好的稀释剂,不建议使用阴性血清稀释.还有CA153,CA199等项目医生对之也有具体值的要求,我们会在今后的工作中逐步试验完善.