网站原创[摘 要 ]目的 研究糖基化终产物(AGEs)对内皮型一氧化合酶(eNOS)的活性及蛋白表达的影响.方法 用糖孵
育法制备糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA),用胶原酶法分离培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs).将内皮细胞与不
同浓度的AGE-BSA在体外分别培养3,6,12,24,48h,用同位素二步色谱法检测基础状态下与组织胺刺激后的eNOS活
性,用蛋白免疫印迹法(Western-blotting)检测eNOS蛋白表达水平.结果 基础状态下,HUVECs的eNOS有部分激活,组
胺刺激后eNOS活性明显增加(P<0.001).AGE-BSA明显抑制基础状态下的eNOS活性和组胺刺激后的eNOS活性增高
(P<0.001),这种仰制作用呈时间、浓度依赖性.AGE-BSA与HUVECs共同孵育24h后的eNOS表达水平明显降低(P<0.001),
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且随着孵育时间的延长,eNOS表达水平进一步降低(P<0.05,48h us 24h),这种抑制作用与AGE-BSA的浓度有
关.结论AGE-BSA明显抑制eNOS基础状态和组胺刺激后的活性增高,AGE-BSA明显抑制HUVECs的eNOS表达,AGE-BSA
对eNOS活性的抑制作用可能与降低eNOS表达有关.
[关 键 词 ]糖基化终产物；一氧化氮合酶；内皮细胞
[中图分类号]R322.123；R329.28 [文献标识码]A [文章编号]1671-7562(2004)05-0283-04