卵巢组织切片的制作

摘 要：本文重点论述了采用石蜡切片法进行卵巢连续组织的切片制作过程.整个切片过程可以划分为修整蜡块、准备工作的进行、切片厚度的确定、切片的实施、铺片、贴片、烘片等四个环节.本文还就切片制作过程中的注意事项进行了论述.

关键字：卵巢组织组织切片石蜡切片

中图分类号：R713.6文献标识码：C文章编号：1005-0515（2013）11-031-01

引言

伴随着科学技术的发展,我国的医学行业也进入了高速发展期.其中“数字人”是计算机科学技术应用于医学研究的一个方面.它将现代计算机技术与医学技术结合到一起,采用计算机图像技术与数据处理技术使人体结构数据化.组织切片的制作是人体结构数据化的第一步,它通过对组织结构进行切片处理,获取组织结构的第一手数据,然而,再通过数据的处理完成结构恢复还原.卵巢组织切片可以用于卵巢部结构的分析、卵巢疾病的治疗都有着重要意义.本文就卵巢组织切片制作过程以及注意事项进行简要的阐述.

一、卵巢连续组织切片的制作

切片的制作主要分为以下几个环节：

1.修整蜡块

根据组织切片的大小,将蜡块修整到适宜的大小.一般会在组织边缘的0.6～1.1处,将余下的蜡块全部切除掉.

2.准备工作

组织切片的制作过程主要包括转轮式切片机、一次性刀片,毛笔、铅笔、弯镊、展片槽、小烧坏、载玻片、漂烘温控仪等.在这些工具准备完毕之后,要将切片刀安装到切片要的刀台上,将刀台上的螺丝紧固住,不要在切片的过程中发生松动.完成刀片的安装,就要进行蜡块的安装.被修整的蜡块要安装在金属持蜡器上,将蜡器的角度调整到合适位置,调整后的蜡块应使其内部的组织处于水平位置.刀刃与蜡块表面应呈5度夹角.将蜡块与刀片调整到适宜的位置,让刀架与蜡块的位置都固定好,使蜡块与刀刃保持接触状态.

切片厚度的确定

切片厚度的确定要考虑到组织结构的特点,要考虑到组织切片的用处,切片机的厚度调节器上具有厚度调整的刻度,范围为0～50μm.切片的厚度既要满足实验的要求,同时也要考虑到切片的染色质量,不应出现掉片的情况,因此,卵巢组织的切片厚度可以确定为30μm.确定好切片厚度,将厚度调节器上的刻度调整到30μm的值上.

切片

先将标本切修出来,当需要进行切片的组织完全显露出来时停止.由于轮转式切片在进行组织的切取时,是由下向上进行的,为了保证切片的完整性不被破坏,组织中不要出现刀纹的裂缝,还要将组织上比较硬或比较脆的一端放在上部分进行切割.切片过程中,注意左手与右手的配合,一般都是左手拿毛笔,右手旋转切刀.操作都应时刻利用毛笔将由于石蜡被切开而发生卷曲的碎片,顺着切片的速度,向下缓慢的移动毛笔,保证切片的平整.一定要注间毛笔的移动速度要与切刀的旋转速度保持一致,过快或过慢都会影响到组织切片的质量.由于切刀在进行组织块的切割过程中会散出一定的热量,石蜡的硬度会发生变化,这时需要采用冰块冷敷的方法,降低切刀片与组织块的温度.

5.铺片

用镊子将蜡带夹起来,保持正面朝上,将蜡带平铺在展片箱的水面上,水温以40～45摄氏度为宜,借助于水的张力,可以将有些褶皱的蜡带展平.但是,如果切片的褶皱过多,或者是蜷曲的十分严重,可以将蜡带先放到酒精内,稍微展开后,再使用载玻片将其放到展片箱中展平.

6.贴片、烘片

当铺片完成后,切片的平整程度满足了研究的要求,就要将其从水面上的捞下来,放到载玻片中间的位置,将多余的水分凛干,放置在空气中一段时间,当切片稍有些干燥后,就可进行烤片操作了.烤片操作由烤片仪完成,烤片的时间一般都是1个小时左右,温度设置在60～68℃,烤至切片上的石蜡全部去除为止.

二、切片制作过程中的注意事项

通常来讲,切片方法的选择与切片的应用以及组织结构的特点有关,常用的切片制作方法有石蜡切片法,上述的卵巢组织切片就是采用的上述方法.除此之外,还有火棉胶切片、冰冻切片法.所谓冰冻切片法就是将新鲜的标本冷冻起来,进行切片制作.这种切片的制作方法不受组织块大小的限制,并且切片的制作过程简单,也是医学研究上被广泛采用的一种方法.火棉胶切法需要耗费大量的时间,各个环节的时间都要比上述的石蜡切片法浪费时间.而上述的卵巢组织切片采用了石蜡切片法,切片的硬度合理,石蜡的浸泡完全,染色的效果也达到了预期的标志,最终卵巢组织切片的获取是十分是成功的.

切片厚度的确定

切片厚度的确定与组织结构与研究实验要求有关.一般来讲,如果是进行大组织切片工作,如果采用切片的厚度定为常规的5μm,这样一来,1mm厚的组织就要切片200张,这样切片的工作量巨大,不仅费时费力,并且切片的准确性会受到影响.然而,也不能为了减少工作量而增大切片的厚度,切片过厚,会对切片的染色产生影响,在切片染色过程中,很容易出现掉片现象.本实验进行卵巢组织切片时,在综合考虑多方因素后,最终将切片的厚度确定为30μm,这样既符合研究实验的要求,工作量还是研究实验人员可以承受的范围.

染色时间的确定

由于本色实验进行的卵巢组织切片的厚度要大于常规切片,因此染色过程与常规切片的染色过程也略有不同.最终将苏木精的染色时间由常规切片的10分钟缩短为3分钟,染色时间应根据光镜下可以分辨组织结构为依据灵活掌握.除此之外,分化时间与伊红染色时间也要精确的掌握,保证切片的染色质量,确定可以准确的观察到组织结构.

定位方法的确定

在进行组织切片的过程中,在进行石蜡切片时,在进行染色时,以及烘干时,组织切片的位置难免会发生一定的移动,产生偏差,为了将偏差控制在不影响研究实验的范围内,可以通过设置一般参照物的方法,保证切位位置的准确性.常用的切片定位方法有外定位法和内定位法.

结语

人体的卵巢组织是人体的重要器官.对卵巢组织进行切片,获取人体卵巢的准确可靠的数据信息,可以有利于卵巢组织各种疾病的治愈.