乌鲁木齐地区维族汉族多发性骨髓瘤对比

【摘 要】目的探讨分析乌鲁木齐地区维族汉族多发性骨髓瘤特征.方法对60例MM患者血清进行血清蛋白电泳、血清免疫固定电泳、尿本周氏蛋白电泳、流式细胞术的检测.结果60例MM患者血清蛋白电泳显示M带31例(维族18例、汉族13例),主要位于γ区,免疫固定电泳分型:IgG、IgA、IgM、游离型,维族、汉族相应的分别为(8,16)、(6,9)、(1,5)、(11,4)例,尿本周氏蛋白检测17例阳性(维族11例,汉族6例),流式分析与汉族MM患者相比,维族男性MM患者CD3细胞、CD4细胞、CD4/CD8比值及B细胞均明显减少(P<0.05),而CD8细胞、NK细胞比例升高,维族女性MM患者CD3细胞、CD4细胞、CD4/CD8比值、NK细胞、B细胞比例均低于汉族MM患者,而CD8细胞比例显著高于汉族MM患者(P<0.05).结论乌鲁木齐地区MM患者存在民族、类别、免疫表型的差异.

【关 键 词】多发性骨髓瘤,免疫固定,免疫表型,流式细胞术

TheparedanalysisofMultipleMyelomaofUygurandHanpeopleinUrumqiRegion

GUOShu-li,TIANYong-fang,MAHui-xia.

DepartmentofClinicalLaboratory,thePeople’sHospitalofUrumqi,XinJiang830001,China

【Abstract】ObjectiveToanalyzecontrastlythetypicalfeaturesofMultipleMyelomaofUygurandHanpeopleinUrumqiregioninXinJiang.MethodsWehedetectedtheserumof60casesbyserumproteinelectrophoresis,immunofixationelectrophoresis,BenceJonesproteinelectrophoresis,andflowcytometry(FCM).ResultsMonocloneproteinpeakwaoundin31outof60casestested(18caseswereUygurpeopleand13caseswereHanpeople),itlocatedmainlyγborder.ThecasesofImmunoglobulinG,ImmunoglobulinA,ImmunoglobulinM,freelightchainwaoundinUygurpeopleandHanpeoplewere(8,16),(6,9),(1,5),(11,4),1respectively.BenceJonesproteinelectrophoresisdetected17caseswerepositive(11caseswereUygurand6caseswereHanpeople).ComparedwiththeMultipleMyelomaofHanpeople,thepercentageoftheCD3,CD4,Bcell,CD4/CD8werereduced(P<0.05)andthepercentageoftheCD8andNKincreasedinmaleUygurpatients.WhileallparametersexceptCD8cellswhichwasreducedinthefemaleMultipleMyelomaofUygur,andthepercentageoftheCD8increasedobviously(P<0.05).ConclusionItwaoundthatcharacteristicsofMultipleMyelomainUrumqi,includingnationality,category,andimmunophenotype.

【Keywords】MultipleMyeloma,Immunofixationelectrophoresis,Immunophenotype,Flowcytometry

多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)又名浆细胞骨髓瘤,是以克隆性恶性浆细胞(骨髓瘤细胞)在骨髓中异常增殖,并伴有单克隆免疫球蛋白增多为特征的疾病[1].本文在对MM患者进行血清蛋白电泳分析、血清免疫固定电泳、和尿本周氏蛋白电泳分析的基础上,采用流式细胞术检测了60例维族汉族MM患者的外周血T细胞亚群、CD+19B细胞亚群、以及CD+16、CD+56NK细胞变化,旨在为临床诊断和治疗提供实验依据.

1材料与方法

1.1标本来源选取新疆维吾尔自治区人民医院血液科2007年6月至2010年2月住院患者60例,其临床表现及实验室检查均符合多发性骨髓瘤诊断标准[2].维族男14例,维族女12例,年龄25~57岁,平均年龄48岁,汉族男18例,汉族女16例,年龄35~65岁,平均年龄59.5岁.

1.2方法

1.2.1血清蛋白电泳采用法国SebiaHydrasys全自动电泳分析系统进行电泳和扫描.

1.2.2血清免疫固定电泳使用法国SebiaHydrasys全自动电泳分析系统及原装配套试剂盒,按操作规程将患者的血清稀释后加样,经琼脂糖凝胶板电泳后,加入抗IgG、抗IgA、抗IgM、抗Kap、抗Lam血清各12.5μl,孵育、固定、沉淀蛋白,吸去多余抗血清,干燥、染色、脱色、烘干,观察结果.

1.2.3尿本周氏蛋白的测定采用法国SebiaHydrasys全自动电泳分析系统及原装配套试剂盒,按操作规程检测后,观察结果.

1.2.4流式细胞术的检测抽取外周血2ml,用EDTA-K2抗凝,检测T细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8)、CD19+B淋巴细胞及CD+16、CD+56NK细胞百分率,按三色免疫荧光直接标记法操作.FACSCalibur流式细胞仪、溶血素、淋巴细胞亚群检测试剂盒均为美国BectonDickinson公司,用流式细胞仪分析抗原表达情况,单抗>20%为阳性.

1.2.5统计学分析采用SPSS13.0软件对数据进行处理,率的比较用χ2检验,组间均数的比较采用样本均数比较的t检验,P<0.05差异有统计学意义.

2结果

2.1血清蛋白电泳60例MM患者中有31例MM患者血清蛋白电泳图谱中出现M蛋白,并且多位于γ区.其中,维族MM患者血清蛋白电泳M带阳性率69.2%,明显高于汉族M带阳性率38.2%,且差异有统计学意义(P<0.05),详见表1.

2.2血清免疫固定电泳维族、汉族多发性骨髓瘤患者的型别比例各不相同:维族女性游离轻链型的比例明显偏高,而汉族男性IgG型的比例已明显偏高,且差异有统计学意义(P<0.05).详见表2.

2.3尿本周氏蛋白分型60例MM患者的尿本周蛋白检测中有17阳性,其中维族MM患者的阳性率明显高于汉族,且尤以维族女性MM患者表现明显,差异有统计学意义(P<0.05).详见表3.

2.4流式细胞术检测分析总体上,维族MM患者CD3细胞、CD4细胞、CD4/CD8比值低于汉族MM患者.维族男性MM患者CD3细胞、CD4细胞、CD4/CD8比值及B细胞均明显减少(P<0.05),而CD8细胞、NK细胞比例升高,维族女性MM患者CD3细胞、CD4细胞、CD4/CD8比值、NK细胞、B细胞比例均明显低于汉族MM患者,而CD8细胞比例显著高于汉族MM患者(P<0.05).具体详见表4.

3讨论

多发性骨髓瘤是浆细胞异常增生的恶性肿瘤,其表现为骨髓内骨髓瘤细胞克隆性增殖,增生的瘤细胞广泛浸润骨骼和软组织,引起溶骨性破坏,致使血清中出现单克隆免疫球蛋白即“M”蛋白,M蛋白经血清蛋白电泳扫描后可见M蛋白峰,M蛋白常出现在γ区[3].本次检测60例MM患者,维族M带的阳性率69.2%明显高于汉族M带的阳性率38.2%,但M蛋白带尚需结合免疫固定电泳检查综合分析.

通过血清进行免疫固定电泳检查后,我们发现汉族男性MM患者偏于IgG型,维族女性MM患者偏于游离轻链型.尿本周蛋白的检测结果表明维族MM患者的阳性率27.8%,明显高于汉族MM患者阳性率17.6%,这可能与维族MM患者偏向于游离轻链型有关.轻链型MM中大量单克隆的游离轻链分子量低,容易通过肾小球滤过膜部分随尿排出,轻链蛋白损伤近曲小管,可致近曲小管机能障碍.因而,尿本周氏蛋白阳性率较高[4].

MM患者机体抗肿瘤免疫反应以细胞免疫为主,T细胞亚群对机体的免疫应答调控和维持免疫稳定具有重要作用,其中CD4细胞在免疫应答中是主要反应细胞.CD8细胞对靶细胞介导细胞毒作用的同时对CD4细胞具有调节性抑制作用,CD4/CD8比值可反映机体细胞免疫功能状态[5].CD16及CD56为NK细胞的标志,

CD19是包括正常浆细胞在内的B细胞系的一个重要标志.吕鸣等[6]报道了CD3细胞、CD4细胞、CD4/CD8比值降低,而NK细胞比例升高,表明MM患者处于疾病的初期.本研究中维族男性MM患者CD3细胞、CD4细胞、CD4/CD8比值及B细胞均明显减少,而CD8细胞、NK细胞比例升高,与文献[6]报道一致.由于NK细胞来源于骨髓造血干细胞,可直接杀伤肿瘤和病毒感染的靶细胞,因此在机体免疫监视和早期抗感染免疫过程中发挥细胞免疫和免疫调节重要作用.

陈银霞等[7]报道了MM患者疾病处于恶化进展阶段时,CD3细胞、CD4细胞、CD4/CD8比值、NK细胞、及B细胞比例降低而CD8细胞比例升高,本研究中维族女性MM患者的结果与其相符.该结果表明T细胞亚群及NK细胞表现异常.CD56属于免疫球蛋白超家族成员,是介导造血细胞粘附的粘附分子之一,与骨髓瘤细胞和骨髓基质细胞的相互作用有关.VanCamp和Sahara[8,9]报道了MM患者CD56水平降低预示着病情的恶化或向浆细胞白血病的转化,且CD+56MM患者具有较高的尿本周氏蛋白.我们的研究结果显示维族女性MM患者偏于游离轻链型且尿本周氏蛋白阳性率明显增高,与VanCamp和Sahara的报道一致.但与国内陈海飞等[10]的报道结果不完全相符.其可能的原因一方面是样本例数所致,另一方面与生活习俗、遗传背景有关.

本研究证实了维族汉族MM患者在MM型别,免疫状态上均有所不同,希望临床能够加以重视,区别对待.然而,迄今为止,MM的发生机制尚未阐明,但目前主要认为与分子细胞遗传学、细胞因子、黏附分子等的作用有关.然而,对于MM患者的民族、型别、免疫状态的差异是否与遗传背景有关,有待进一步深入研究.